目錄純化水微生物檢測方法 初始污染菌在藥典哪一部 純化水微生物檢測 純化水微生物限度檢查薄膜過濾法 純化水取樣方法
1檢測前的準備
1.1儀器：微生行兆物限度檢驗儀
微生物限度培養器
1.2培養基：TGYA瓊脂培養基、R2A瓊脂培養基
上述培養基均須做培養基的促生長試驗，TGYA瓊脂培養基的促生長試驗參見微生物計數操作檢查法SOP07-QC-3-017，R2A瓊脂培養基促生長試驗中選擇的菌種是銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、金黃色葡萄糖球菌，操作方法同微生物計數操作檢查法SOP07-QC-3-017中培養基的促生長試驗。
75%的酒精
1.3開啟凈化工作臺，把微生物限度檢驗儀連接電源。
2檢測
2.1薄膜過濾法
使用孔徑大小不超過0.45μm的薄膜過濾器。
2.2在凈化工作臺下，用火焰噴槍對泵頭端面和過濾片進行消毒。把微生物限度培養器固定在微生物限度檢驗儀上，打開微生物限度培養器蓋子。
2.3取50ml的純化水，倒入微生物限度培養器中，打開微生物限度檢驗儀開關，立即過濾。過濾完成后，取下過濾器，檔升租在過濾器膜的另一面中，笑攔傾注TGYA瓊脂培養基，蓋上蓋子。
2.4取50ml的純化水，倒入微生物限度培養器中，打開微生物限度檢驗儀開關，立即過濾。過濾完成后，取下過濾器，在過濾器膜的另一面中，傾注R2A瓊脂培養基，蓋上蓋子。
2.5每個樣品過濾后均做2單個培養，檢測完畢，取一微生物限度培養器固定在微生物限度檢驗儀上，注入100ml的75%酒精過濾，關閉儀器、電源。
3培養
傾注TGYA瓊脂培養基的，在30℃-35℃培養48h-72h，并計數。傾注R2A瓊脂培養基的，在20℃-25℃培養5d-7d，并計數。
分別計算和報告兩種培養基每1ml純化水中的cfu值。
4.10微生物限度(薄膜過濾法)
4.10.1取相當于每張濾膜含1g或1ml供試品的供試液，加至適量的稀釋劑中，混勻，過濾。若供試品每1g或1ml所含的菌數較多時，可取適量稀釋劑的供試液1ml過濾。用pH7.0無菌氯化鈉－蛋白胨緩沖液或其他適宜的沖洗液沖洗濾膜，沖芹擾洗方法和沖洗量同“計數方法的驗證”。沖洗后取出濾膜，菌面朝上貼于營養瓊脂培養基或玫瑰紅鈉瓊脂培養基或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養基平板上培養。每種培養基至少制備一張濾膜。
4.10.2陰性對照試驗取試驗用的稀釋液1ml，照上述戚首塵薄膜過濾法操作，作為陰性對照。陰性對照不得有菌生長。
4.10.3培養和計數除另有規定外，細菌培養48小時，逐日點計菌落數，一般以48小時的菌落數報告；霉菌、酵母菌培養72小時，逐日點計菌落數，一般以72小時高禪的菌落數報告；必要時，可適當延長培養時間至5～7天進行菌落計數并報告。菌落蔓延生長成片的平板不宜計數。點計菌落數后，計算各稀釋級供試液的平均菌落數，按菌數報告規則報告菌數。若同稀釋級兩個平板的菌落平均數不少于15，則兩個平板的菌落數不能相差1倍或以上。
4.10.4菌數報告原則以相當于1g或1ml供試品的菌落數報告菌數；若濾膜上無菌落生長，以<1報告菌數（每張濾膜過濾1g或1ml供試品），或<1乘以稀釋倍數的值報告菌數。
這是我們公司的純化水微生物檢測部分內容，請參考。
在醫藥的生產過程中，純化水的質量是關系到藥品質量的一個首要原因。純化水在生產，儲存和運輸的過程中，非常容易受到微生物的污染，因此對于水質的日常檢測是質量部門一個重要工作。對于純化水微生物限度檢查，各國所使用的方法不外乎與培養基澆注法，涂布法，膜過濾法，以及最大可能數法，最大的區別在于所使用的培養基不同。
我總結了以下對于純化水微生物限度檢查方法，同時我司熟悉純化水檢測相關標準和檢測項目要求，可提供專業、可靠的純化水檢測服務，出具國家認可的純化水微生物限度檢查報告。cma資質認證如下：
對于活力比較強的微生物，在高營養性培養基上可以快速大量的生長，而對于活力比較差的微生物，生長速度會比較緩慢。在日常生活中，這兩種微生物經常會同時出現由由于它們的生長速率不同，會產生無法完全檢出的現象，因此高營養性培養基和低營養性培養基常常會同時使用來提高微生物的檢出率，
培養的溫度和時間同樣是影響檢測的條件，高營養性培養基通常在30-35℃培養48-72小時，但是在同一個中，培養的時間越長，可以檢出的微生物數量就越多，低營養性培養基就在這時候亮逗被設計出來，有些培養基的培養時間甚至達到14天，可以至大化的復蘇低營養性微生物及受損傷的微生物。但是檢測周期的延長，對于工作效率來說，是很不利的，因此我們需要一個既能保證效率，又能保證檢出率的辦法。
在比較了中國藥典，美國藥典中所記載的方法，中國藥典中純化水微生物檢查所用到的培養基是 R2A 瓊脂培養基，在30-35℃培養大于5天逗跡。美國藥典中對于純化水的微生物檢測用何種培養基沒有做強制性規定，只要求在水確認驗證及周期性確認驗證時，使用適當的方法對水中的微生物做出評價即可。
《中國藥典》2010版、2015版以及2020版純化水微生物限度檢查中表示，生產企業必須確保純化水的質量符合藥典要求，但藥典對于純化水的規定其實也只是至低水平，滿足了藥典的標準不一定就能保證符合企業預期用途的要求。因此，開展純化水微生物限度檢查直接影響到生產產品的安全質量，中科檢測具有純化水微生物限度核查檢測，具有獨立山鍵并實驗室，報告具有CMA和CNAS資質。
細菌計數：純化水取芹顫虧水樣100
ml，并做陰性對照，經直徑為50
mm、孔徑0.45μm
的薄膜過濾器過濾，小心取出濾膜，菌面向上貼于營養瓊脂培養基平板上，將培養皿倒置于培養箱中，于30～35℃培養72
h，菌落計數，
霉菌及酵母菌計數：純化水取水樣100
ml，并做陰性對照，經直徑為50
mm、孔徑0.45μm
的薄膜過濾器過濾，小心取出濾膜，菌面向洞隱上貼于玫瑰紅鈉培養基平板上，將培養皿倒置于培養箱中，于23～28℃培養5天（可延長到7天），菌落計嫌神數；
準中梁搏備工作：
用純化水浸泡濾膜，浸泡完全渣猜后放入濾杯中，包好濾杯，賣祥連同量筒、培養基、平皿、取膜器、三角燒瓶等一起121℃滅菌30min。
滅菌后的物品一并傳入潔凈室中，微生物限度過濾器上連好已經滅好的濾杯，用緩沖液先潤濕濾膜，抽掉緩沖液，然后倒入供試液（10倍稀釋），濾過，再用緩沖液沖洗濾膜。
過濾結束后取下濾膜平貼于R2A瓊脂培養基平板上，32℃倒置培養5天。
菌落計數（平皿上長幾個菌結果就報幾個菌）
