目錄生物實驗中的變量怎么寫 生物實驗法有哪些類型 高中生物科學(xué)方法歸納 生物學(xué)常用的三種實驗方法 生物實驗方法有哪幾種
植物細胞的吸水和失水的實驗
一、實驗準(zhǔn)備
(一)材料:長余扒和得較粗壯的幼苗,蘿卜條或馬鈴薯條。
(二)用品:燒杯,試管,清水,鹽水。
二、方法步驟
(一)豎盯取兩塊蘿卜條或馬鈴薯條,分別放人盛有清水和鹽水的燒杯中浸泡,過一段時間取出,可見清水中的蘿卜條硬挺,而鹽水中的蘿卜條則軟縮。這表明植物細胞可以吸水,也可以失水,并且吸水和失水與環(huán)境中溶液的濃度有關(guān)系。應(yīng)注意此實驗最好是在課前做好,或在上一節(jié)課時布置給學(xué)生。實驗過程需要約20min。
(二)此實驗也可用兩株植物幼苗,分別將它們的根部插在盛有清水和鹽水(或糖水)的兩個試管內(nèi),大約20min左右,從試管里取出兩棵幼苗進行比較,可見清水中的幼苗硬挺,而鹽水(或糖水)中的幼苗則萎蔫了。這同樣可以證明植物細胞可以吸水,也可以失水。此實驗同時還說明了土壤溶液濃度過大或施肥過量影響根吸收水分的道理。
三、教學(xué)建議
植物細胞吸水實驗既是教材中《根對水分的吸收》一節(jié)的演示實驗,又是這一節(jié)課的引言。本實驗大約需要20min左右的時間。因此,可以發(fā)動學(xué)生在課前自己用生活中常用的器皿開展實驗,然后拿到課堂上演示。在演示時,應(yīng)在實驗材料的后面加一張白紙作此好為背景,以便使學(xué)生能觀察清楚。
實驗一:使用高倍顯微鏡觀察幾種細胞
一、實驗?zāi)康模?/p>
1、學(xué)會如何使用顯微鏡觀察細胞;
2、了解細胞的結(jié)構(gòu);
3、學(xué)會制作臨時裝片。
二、實驗材料:(實驗材料可換)松針、動物血液、動物神經(jīng)細胞永久裝片
三、實驗用具:載玻片、蓋玻片、蒸餾水、滴管、鑷子、土豆、刀片、顯微鏡(物鏡5X、10X、40X)
四、方法步驟:
1、制作松針的臨時切片:
(1)取干凈的載玻片一個平置于試驗臺上,用滴管在載玻片中央滴一滴蒸餾水。
(2)將土豆切成條狀(截面約:0.5X12.5px)取兩條,將一根松針夾在兩個土豆條之間,用刀片削成盡量薄的薄片,削時,手腕不動,靠大臂帶動小臂移動刀片。切片數(shù)次。從中選取較薄的切片,置于載玻片的水滴上。
(3)從一側(cè)輕輕蓋上蓋玻片,不要產(chǎn)生氣泡。用吸水紙輕輕吸去蓋玻片周圍的水滴,即完成臨時切片的制作。
2、觀察切片:
(1)取出顯微鏡,置于試驗臺上靠左的位置,打開光源。
(2) 將上步制作好的切片置于顯微鏡的載物臺上,調(diào)整載物臺位置,使蓋玻片對準(zhǔn)光源。
(3)使用5X物鏡觀察切片,使松針切片在視野中心,換成10X物鏡,觀察松針葉面橫切結(jié)構(gòu)。
(4)換成40X物鏡觀察,注意細胞及細胞內(nèi)物質(zhì)結(jié)構(gòu),畫圖。
3、 動物血液臨時裝片的制作及觀察(除了不用切片,其他類似)
4、 動物神經(jīng)細胞永久裝片的觀察。
五、考點提示:
1、松針的葉面結(jié)構(gòu)是什么樣的?
2、動物細胞的結(jié)構(gòu)是什么樣的?與植物細胞又什么不同?
3、顯微鏡的物鏡倍數(shù)愈大,視野的亮度如何?物體的大小如何?
4、如何調(diào)節(jié)焦距?
5、如何才能使切片盡量的薄?切片的厚薄對顯微鏡下觀察的效果有什么影響。
實驗二:檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)
一、實驗?zāi)康模?/p>
嘗試用化學(xué)試劑檢測生物組織中糖類、脂肪和蛋白質(zhì),闡明實驗原理—顏色反應(yīng),識記和區(qū)分用于可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)鑒定的試劑及產(chǎn)生的特定顏色,初步掌握鑒定上述化合物的基本方法,學(xué)會描述實驗現(xiàn)象,掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法。
二、實驗原理:
某些化學(xué)試劑能使生物組織中的有關(guān)有機化合物,產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。
1、生物組織中普遍存在的可溶性糖類較多,有葡萄糖、果糖、麥芽糖和蔗糖。前三種糖的分子內(nèi)都含有游離的具還原性的半縮醛羥基,因此叫做還原糖;蔗糖分子內(nèi)沒有,為非還原糖。實驗中所用的斐林試劑,只能鑒定生物組織中可溶性還原糖,而不能鑒定可溶性非還原糖。可溶性還原糖(如葡萄糖、果糖、麥芽糖)與斐林試劑發(fā)生作用,可生成磚紅色的Cu 2O沉淀。如:
葡萄糖 + 2Cu2+ + 4OH—加熱葡萄糖酸 + Cu 2O↓(磚紅色)+ H 2O
即Cu 2+被還原成Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。
用斐林試劑鑒定還原糖時,溶液變化過程為:淺藍色→棕色→磚紅色沉淀
淀粉遇碘變藍色(直鏈)或紫(紅)色(支鏈)。
2、脂肪和類脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)統(tǒng)稱為脂類。它是構(gòu)成人體組織的正常成分,不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶劑中。在化學(xué)組成上,脂類屬于脂肪神迅酸的酯或與這些酯有關(guān)的物質(zhì)。脂類的主要功能是氧化供能。
脂肪主要存積于脂肪組織中,并以油滴狀的微粒存在脂肪細胞漿內(nèi)。
在病理檢驗中,脂類染色法最常用以證明脂肪變性,脂肪栓子以及腫瘤的鑒別。脂類染色使用最廣泛的染料是蘇丹染料,最常用的有蘇丹Ⅲ,蘇丹Ⅳ,蘇丹黑及油紅O等。脂肪被染色,實際上是蘇丹染料被脂肪溶解吸附而呈現(xiàn)染料的顏色。經(jīng)研究認為組織中脂質(zhì)在液態(tài)或半液雹沒態(tài)時,對蘇丹染料著色效果最好。根據(jù)這一原理,適當(dāng)提高溫度(37℃-60℃)對組織切片染色效果是有好處的。
脂類染色,用冰凍或石蠟切片,以水溶性封固劑封固,如甘油、明膠和阿拉伯糖膠等。
脂肪可以被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色或橙紅色(或被蘇丹Ⅳ染液染成紅色),膽脂素呈淡紅色,脂肪酸不著色,細胞核呈藍色。
3、蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用,產(chǎn)生紫色反應(yīng)。(蛋白質(zhì)分子中含有很多肽鍵,在堿性NaOH溶液中能與雙縮脲試劑中的Cu2+作用,產(chǎn)生紫色反應(yīng)。)
三、實驗材料:
1、做可溶性還原性糖鑒定實驗,應(yīng)選含糖高,顏色為白色的植物組織,如蘋果、梨。(因為組織的顏色較淺,易于觀察。)經(jīng)試驗比較,顏色反應(yīng)的明顯程度依次為蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿卜。
2、做脂肪的鑒定實驗。應(yīng)選富含脂肪的種子,以花生種子為最游肆此好,實驗前一般要浸泡3~4小時(也可用蓖麻種子)。
3、做蛋白質(zhì)的鑒定實驗,可用富含蛋白質(zhì)的黃豆或雞蛋清。
4、淀粉的鑒定:馬鈴薯勻漿。
四、實驗用具:雙面刀片、試管(最好用刻度試管)、試管夾、試管架、大小燒杯、小量筒、滴管、酒精燈、三腳架、石棉網(wǎng)、火柴、載玻片、蓋玻片、毛筆、吸水紙、顯微鏡
五、實驗試劑:
1.斐林試劑(包括甲液:質(zhì)量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液和乙液:質(zhì)量濃度為0.05g/ mL CuSO4溶液)
2.蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液
3.雙縮脲試劑(包括A液:質(zhì)量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液和B液:質(zhì)量濃度為0.01g/ mL CuSO4溶液)
4.體積分數(shù)為50%的酒精溶液
5.碘液
6.蒸餾水
六、方法步驟:
一、可溶性糖的鑒定
操 作 方 法
注 意 問 題
解 釋
1. 制備組織樣液。
(去皮、切塊、研磨、過濾)
蘋果或梨組織液必須臨時制備。
因蘋果多酚氧化酶含量高,組織液很易被氧化成褐色,將產(chǎn)生的顏色掩蓋。
2. 取1支試管,向試管內(nèi)注入2mL組織樣液。
3. 向試管內(nèi)注入1mL新制的斐林試劑,振蕩。
應(yīng)將組成斐林試劑的甲液、乙液分別配制、儲存,使用前才將甲、乙液等量混勻成斐林試劑;
切勿將甲液、乙液分別加入蘋果組織樣液中進行檢測。
斐林試劑很不穩(wěn)定,甲、乙液混合保存時,生成的Cu ( OH )2在70~ 900C下分解成黑色CuO和水;
甲、乙液分別加入時可能會與組織樣液發(fā)生反應(yīng),無Cu OH生成。
4. 試管放在盛有50-650C溫水的大燒杯中,加熱約2分鐘,觀察到溶液顏色:淺藍色 →棕色 → 磚紅色(沉淀)
最好用試管夾夾住試管上部,使試管底部不觸及燒杯底部,試管口不朝向?qū)嶒炚摺?/p>
也可用酒精燈對試管直接加熱。
防止試管內(nèi)的溶液沖出試管,造成燙傷;
縮短實驗時間。
二、脂肪的鑒定
操 作 方 法
注 意 問 題
解 釋
花生種子浸泡、去皮、切下一些子葉薄片,將薄片放在載玻片的水滴中,用吸水紙吸去裝片中的水。
干種子要浸泡3~4小時,新花生的浸泡時間可縮短。
因為浸泡時間短,不易切片;浸泡時間過長,組織較軟,切片不易成形。切片要盡可能薄些,便于觀察。
在子葉薄片上滴2~3滴蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液,染色1分鐘。
染色時間不宜過長。
用吸水紙吸去薄片周圍染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精。
酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,會影響對橘黃色脂肪滴的觀察。同時,酒精是脂溶性溶劑,可將花生細胞中的脂肪顆粒溶解成油滴。
用吸水紙吸去薄片周圍酒精,滴上1~2滴蒸餾水,蓋上蓋玻片。
滴上清水可防止蓋蓋玻片時產(chǎn)生氣泡。
低倍鏡下找到花生子葉薄片的最薄處,可看到細胞中有染成橘黃色或紅色圓形小顆粒。
裝片不宜久放。
時間一長,油滴會溶解在乙醇中。
三、蛋白質(zhì)的鑒定
操 作 方 法
注 意 問 題
解 釋
制備組織樣液。
(浸泡、去皮研磨、過濾。)
黃豆浸泡1至2天,容易研磨成漿,也可購新鮮豆?jié){以節(jié)約實驗時間。
鑒定。加樣液約2ml于試管中,加入雙縮脲試劑A,搖勻;再加入雙縮脲試劑B液3~4滴,搖勻,溶液變紫色。
A液和B液也要分開配制,儲存。鑒定時先加A液后加B液。
CuSO4溶液不能多加。
先加NaOH溶液,為Cu2+與蛋白質(zhì)反應(yīng)提供一個堿性的環(huán)境。A、B液混裝或同時加入,會導(dǎo)致Cu2+變成Cu ( OH ) 2沉淀,而失效。
否則CuSO4的藍色會遮蓋反應(yīng)的真實顏色。
可用蛋清代替豆?jié){。
蛋清要先稀釋。
如果稀釋不夠,在實驗中蛋清粘在試管壁,與雙縮脲試劑反應(yīng)后會粘固在試管內(nèi)壁上,使反應(yīng)不容易徹底,并且試管也不易洗干凈。
附:淀粉的檢測和觀察
用試管取2ml待測組織樣液,向試管內(nèi)滴加2滴碘液,觀察顏色變化。
碘液不要滴太多
以免影響顏色觀察
七、考點提示:
1、常見還原性糖與非還原性糖有哪些? 答:葡萄糖、果糖、麥芽糖都是還原性糖;淀粉、蔗糖、纖維素都是非還原性糖。 2、還原性糖植物組織取材條件? 答:含糖量較高、顏色為白色或近于白色,如:蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿卜等。 3、研磨中為何要加石英砂?不加石英砂對實驗有何影響? 答:加石英砂是為了使研磨更充分。不加石英砂會使組織樣液中還原性糖減少,使鑒定時溶液顏色變化不明顯。 4、斐林試劑甲、乙兩液的使用方法?混合的目的?為何要現(xiàn)混現(xiàn)用? 答:混合后使用;產(chǎn)生氫氧化銅;氫氧化銅不穩(wěn)定。 5、還原性糖中加入斐林試劑后,溶液顏色變化的順序為? 答:淺藍色棕色 磚紅色。6、花生種子切片為何要薄? 答:只有很薄的切片,才能透光,而用于顯微鏡的觀察。 7、轉(zhuǎn)動細準(zhǔn)焦螺旋時,若花生切片的細胞總有一部分清晰,另一部分模糊,其原因一般是什么? 答:切片的厚薄不均勻。 8、脂肪鑒定中乙醇作用? 答:洗去浮色。 9、雙縮脲試劑A、B兩液是否混合后用?先加A液的目的怎樣通過對比看顏色變化? 答:不能混合;先加A液的目的是使溶液呈堿性;先留出一些大豆組織樣液做對比。
實驗三:觀察DNA和RNA在細胞中的分布
一、實驗原理:
1、真核細胞的DNA主要分布在細胞核內(nèi),RNA主要分布在細胞質(zhì)中。
2、甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對DNA和RNA的親和力不同,甲基綠對DNA親和力強,使DNA顯現(xiàn)出綠色,而吡羅紅對RNA的親和力強,使RNA呈現(xiàn)出紅色。用甲基綠、吡羅紅的混合染色劑將細胞染色,可同時顯示DNA和RNA在細胞中的分布。
3、鹽酸的作用
① 鹽酸能改變細胞膜的通透性,加速染色劑的跨膜運輸;
② 鹽酸使染色體中的DNA與蛋白質(zhì)分離,便于DNA與染色劑的結(jié)合
二、實驗材料:人的口腔上皮細胞、洋蔥鱗片葉表皮細胞
三、實驗用具:大小燒杯、溫度計、滴管、消毒牙簽、載玻片、蓋玻片、鐵架臺、
石棉網(wǎng)、火柴、酒精燈、吸水紙、顯微鏡
四、方法步驟:
1、取材
① 滴:在潔凈的載玻片上滴一滴質(zhì)量分數(shù)為0.9%的NaCl溶液;
② 刮:用消毒牙簽在口腔內(nèi)側(cè)壁上輕輕地刮幾下;
③ 涂:將牙簽上的碎屑涂抹在載玻片的生理鹽水中;
④ 烘:將涂有口腔上皮細胞的載玻片在酒精燈的火焰上烘干。
2、水解
① 解:將烘干的載玻片放入裝有30ml質(zhì)量分數(shù)為8%的鹽酸的小燒杯中,進行材料的水解;
② 保:將小燒杯放入裝有30℃溫水的大燒杯中保溫5分鐘。
3、沖洗涂片
① 沖:用緩緩的蒸餾水沖洗載玻片10秒鐘;
② 吸:用吸水紙吸去載玻片上的水分。
4、染色
① 染:用2滴吡羅紅甲基綠混合染色劑滴在載玻片上,染色5分鐘;
② 吸:吸去多余染色劑;
③ 蓋:蓋上蓋玻片。
5、觀察
① 低:在低倍物鏡下,尋找染色均勻,色澤淺的區(qū)域,移至視野中央,將物像調(diào)節(jié)清晰;
② 高:轉(zhuǎn)到高倍物鏡,調(diào)節(jié)細準(zhǔn)焦螺旋,觀察細胞核和細胞質(zhì)的染色情況。
五、考點提示:
1、取口腔上皮細胞之前,應(yīng)先漱口,以避免裝片中出現(xiàn)太多的雜質(zhì);
2、取洋蔥表皮細胞時,盡量避免材料上帶有葉肉組織細胞;
3、沖洗載玻片時水的流速要盡量慢,切忌直接用水龍頭沖洗;
4、用酒精燈烘烤載玻片時,不要只集中于材料處,而應(yīng)將載玻片在火焰上來回移動,使載玻片均勻受熱,以免破裂;
5、烘烤后的載玻片不要馬上放入盛有稀鹽酸的燒杯中,最好先自然冷卻1分鐘。
實驗四:體驗制備細胞膜的方法
一、實驗原理:細胞膜的流動性和半透性
二、實驗材料:豬(或牛、羊、人)的新鮮的紅細胞稀釋液(血液加適量的生理鹽水)
三、實驗用具:蒸餾水、試管、吸水紙、載玻片、蓋玻片、顯微鏡
四、方法步驟:
1、用試管吸取少量紅細胞稀釋液,滴一小滴在載玻片上,蓋上蓋玻片,制成臨時裝片
2、在高倍鏡下觀察,待觀察清晰時,在蓋玻片的一側(cè)滴一滴蒸餾水,同時在另一側(cè)用吸水紙小心吸引,注意不要把細胞吸跑。上述操作均在載物臺上進行,并持續(xù)觀察細胞的變化。可以看到近水的部分紅細胞發(fā)生變化;凹陷消失,細胞體積增大,很快細胞破裂,內(nèi)容物流出。
五、考點提示:
1、選擇動物細胞進行實驗的原因:動物細胞無細胞壁。
2、選擇哺乳動物成熟紅細胞進行實驗的原因:人和其他哺乳動物成熟紅細胞無細胞核和眾多的細胞器(膜),可以得到較純凈的細胞膜。
3、細胞破裂后,用什么方法獲得較純的細胞膜:將漲破的細胞溶液,經(jīng)過離心分離得到細胞膜。
4、如何獲得植物細胞膜:先用纖維素酶和果膠酶將植物細胞壁水解得到原生質(zhì)體;再將原生質(zhì)體放入清水中,水自由擴散進入,原生質(zhì)體漲破;最后經(jīng)過離心分離得到植物細胞膜。
5、稀釋及稀釋的時候用生理鹽水的原因:稀釋后,可以減少血液中的血漿蛋白等雜物。用生理鹽水是為了保持滲透壓,防止在稀釋的時候就發(fā)生細胞破裂。
實驗五:用高倍顯微鏡觀察葉綠體和線粒體
一、實驗原理:
1、葉肉細胞中的葉綠體,呈綠色、扁平的橢球形或球形,散布于細胞質(zhì)中,可以在高倍顯微鏡下觀察它的形態(tài)。
2、線粒體普遍存在于動物細胞和植物細胞中,健那綠染液能使活細胞中的線粒體呈現(xiàn)藍綠色。通過染色,可以在高倍顯微鏡下觀察到處于生活狀態(tài)的線粒體的形態(tài)有短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形等。
二、實驗材料:新鮮的蘚類的葉、人的口腔上皮細胞、新配制的質(zhì)量分數(shù)為1%的健那綠染液(將0.5g健那綠溶解于50mL生理鹽水中,加溫到30-40攝氏度,使其充分溶解)
三、實驗用具:顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、消毒牙簽
四、方法步驟:
1、觀察葉綠體
低倍鏡下找到葉片細胞→低倍鏡下找到葉片細胞→高倍鏡下觀察。
2、觀察線粒體
染色→制片→低倍鏡下找到口腔上皮細胞→高倍鏡下觀察。
五、考點提示:
1、觀察葉綠體時選擇蘚類葉的原因:蘚類屬于低等植物,葉片是綠色的單層細胞,不需加工即可進行觀察。
2、臨時裝片中的材料要隨時保持有水狀態(tài)的原因:保證細胞器的正常形態(tài)并能懸浮在細胞質(zhì)基質(zhì)中,否則,細胞失水收縮,將影響細胞器形態(tài)的觀察。
實驗六:植物細胞的吸水和失水
一、實驗?zāi)康模?/p>
1、學(xué)會使用顯微鏡觀察植物細胞質(zhì)壁分離和復(fù)原。(與前面的知識:顯微鏡的使用聯(lián)系)
2、觀察不同濃度的溶液對細胞吸水失水的影響,掌握此種方法的具體應(yīng)用。
3、通過觀察植物細胞的吸水和失水,明確滲透的組成以及具體應(yīng)用。
二、實驗原理:
1、成熟的植物細胞放到一定濃度的溶液中構(gòu)成一個滲透。當(dāng)細胞大量失水時原生質(zhì)層與細胞壁的伸縮程度不同,導(dǎo)致原生質(zhì)層和細胞壁分離。
2、當(dāng)外界溶液濃度大于細胞液濃度時,根據(jù)擴散作用原理,水分會由細胞液中滲出到外界溶液中,通過滲透作用失水;由于細胞壁和原生質(zhì)層的伸縮性不同,細胞壁伸縮性較小,而原生質(zhì)層性較大,從而使二者分開;反之,外界溶液濃度大于細胞液濃度,則細胞通過滲透作用吸水,分離后的質(zhì)和壁又復(fù)原。
三、實驗材料:紫色特別深的洋蔥外表皮、質(zhì)量濃度為0.3g/ml的蔗糖溶液、清水
四、實驗用具:顯微鏡、鑷子、刀片、載玻片、蓋玻片、滴管、吸水紙
五、方法步驟:
1、用刀片在洋蔥鱗片葉的外表面劃一個小方塊,用鑷子撕取這一小塊洋蔥表皮,在洋蔥的外表皮上,用刀片劃一些方塊,用鑷子輕輕撕取一小塊(撕取的僅僅是外表皮,不要撕得太厚,仍然作為一個問題留給學(xué)生)。在取標(biāo)本時,可以將洋蔥的內(nèi)表皮朝外,外表皮朝里進行對折,不要太用力,然后取其外表皮作為材料,將它平展地放在載玻片中央的清水滴中,并蓋上蓋玻片。
2、用低倍鏡觀察洋蔥表皮細胞中紫色的中央液泡大小,以及原生質(zhì)層的位置。
3、從蓋玻片的一側(cè)滴入0.3g/ml的蔗糖溶液,在蓋玻片的另一側(cè)用吸水紙吸引。這樣重復(fù)幾次,洋蔥表皮細胞就侵潤在蔗糖溶液中。注意重復(fù)3-4次。
4、再用低倍鏡觀察洋蔥表皮細胞中紫色的中央液泡大小,以及原生質(zhì)層的位置。
5、從蓋玻片的一側(cè)滴入清水,在蓋玻片的另一側(cè)用吸水紙吸引,這樣重復(fù)幾次,洋蔥表皮細胞就侵潤在清水中。
6、還用低倍鏡觀察洋蔥表皮細胞中紫色的中央液泡大小,以及原生質(zhì)層的位置。
六、實驗結(jié)論:
當(dāng)外界溶液濃度大于細胞液濃度時,水分會由細胞液中滲出到外界溶液中,通過滲透作用失水;由于細胞壁和原生質(zhì)層的伸縮性不同,細胞壁伸縮性較小,而原生質(zhì)層性較大,從而使二者分開;反之,當(dāng)外界溶液濃度低于細胞液濃度時,則細胞通過滲透作用吸水,分離后的質(zhì)和細胞壁又復(fù)原。
實驗七:比較過氧化氫在不同條件下的分解
一、實驗?zāi)康模?/p>
通過比較過氧化氫在不同條件下分解的快慢,了解過氧化氫酶的作用和意義
二、實驗原理:
新鮮的肝臟中含有過氧化氫酶,根據(jù)酶的專一性,可知其可以催化過氧化氫分解成水和氧。
三、實驗材料:
質(zhì)量分數(shù)為20%的豬肝研磨液,新配制的體積分數(shù)為3%的過氧化氫溶液,質(zhì)量分數(shù)為3.5%的FeCl3溶液
四、實驗用具:
量筒,試管,滴管,試管夾,試管架,衛(wèi)生香,火柴,酒精燈,大燒杯,石棉網(wǎng),溫度計
五、方法步驟:
1、取4支潔凈試管,分別編號1,2,3,4,向試管內(nèi)分別加入2ml過氧化氫溶液。
2、將2號試管放在90℃左右的水浴中加熱,觀察氣泡情況,并與1號試管作比較。
3、向3號試管內(nèi)滴入2滴FeCl3溶液,向4號試管內(nèi)滴入2滴肝臟研磨液,觀察哪支試管產(chǎn)生的氣泡多。
4、2至3min后,將點燃的衛(wèi)生香分別放在3、4號試管內(nèi)液面的上方,觀察哪支試管中的衛(wèi)生香燃燒更猛烈。
六、實驗結(jié)論:
1、加熱能促進H2O2的分解,提高反應(yīng)速率;
2、酶有催化作用,與無機催化劑相比,酶具有高效性。
實驗八:影響酶活性的條件
一、實驗?zāi)康模?/p>
1、初步學(xué)會探索影響酶活性條件的方法。
2、探索過氧化氫酶在不同溫度和PH下催化過氧化氫水解的情況。
二、實驗原理:
淀粉遇碘后,形成紫藍色的復(fù)合物。麥芽糖和葡萄糖遇碘后,不形成紫藍色的復(fù)合物,但能
與斐林試劑發(fā)生氧化還原反應(yīng),生成磚紅色的氧化亞銅沉淀。
三、實驗材料:
質(zhì)量分數(shù)為2%的新配置的淀粉酶溶液,新鮮的質(zhì)量分數(shù)為20%的豬肝研磨液,
質(zhì)量分數(shù)為3%的可溶性淀粉溶液,新配制的體積分數(shù)為3%的過氧化氫溶液,
質(zhì)量分數(shù)為5%的鹽酸,質(zhì)量分數(shù)為5%的氫氧化鈉溶液,蒸餾水,冰水,熱水,
碘液,斐林試劑
四、實驗用具:量筒,試管,滴管,試管夾,三腳架,火柴,酒精燈,小燒杯,大燒杯,石棉網(wǎng),溫度計,
五、方法步驟:
一、溫度對酶活性的影響
1、取三支潔凈的試管,編上號1,2,3,并分別注入2ml可溶性淀粉液。
2、分別向1,2,3號三支試管中各注入1ml新鮮的淀粉酶溶液,搖勻,依次放入沸水,37℃左右的熱水,冰水中,維持各自的溫度5分鐘。
3、分別向1,2,3號三支試管中各滴入一滴碘液,然后搖勻。觀察并記錄這三只試管中,溶液顏色的變化情況。
二、pH對酶活性的影響
1、取三支潔凈的試管,編上號1,2,3,并分別注入1ml的新鮮的淀粉酶溶液。
2、依次向1號,2號,3號試管中注入蒸餾水,氫氧化鈉溶液,稀鹽酸各1ml并搖勻。
3、分別向1號,2號,3號試管中各注入2ml可溶性淀粉溶液,震蕩搖勻。
4、將三支試管的下半部浸到37℃左右的溫水中,保溫5分鐘。
5、向三支試管中各加入2ml斐林試劑,震蕩搖勻。
六、實驗現(xiàn)象:
一、溫度對酶活性的影響
1號試管中的液體未變藍,2號和3號試管中的液體變藍,且2號試管藍色比3號試管深。
二、pH對酶活性的影響
2號和3號試管中的液體未變藍,1號試管中的液體變藍。
七、實驗結(jié)論:
1、在最適宜的溫度和最適宜的ph條件下,酶的活性最高。
2、溫度和ph偏高或偏低,酶的活性明顯下降。
實驗九:葉綠體中色素的提取和分離
一、實驗?zāi)康模?/p>
1、初步掌握提取和分離葉綠體中色素的方法。
2、探索葉綠體中有幾種色素。
二、實驗原理:
1、葉綠體中的色素能溶解在丙酮(有機溶劑,酒精、汽油、苯、石油醚等)中,所以用丙酮可提取葉綠體中色素。
2、色素在層析液中溶解度不同,溶解度高的色素分子隨層析液在濾紙條上的擴散得快,溶解度低的色素分子隨層析液在濾紙條上的擴散得慢,因而可用層析液將不同的色素分離。
三、實驗材料:
新鮮的綠葉(如菠菜的綠葉),無水乙醇,層析液(由20份在60~90℃下分餾出來的石油醚、2份乙醇和1份苯混合而成。93號汽油也可代用),二氧化硅和碳酸鈣。
四、實驗用具:
干燥的定性濾紙,試管,棉塞,試管架,研缽,玻璃漏斗,尼龍布,毛細吸管,剪刀,藥勺,量筒(10ml),天平。
五、方法步驟:
(1)稱取5g綠色葉片并剪碎
提取色素研缽→研磨→漏斗過濾→
(2)加入少量SiO2、CaCO3和5ml丙酮 收集到試管內(nèi)并塞緊管口
(1)將干燥的濾紙剪成150px長,25px寬的紙條,剪去一端兩角(使層析液同時到達濾液細線)
制濾紙條
(2)在距剪角一端25px處用鉛筆畫線
(1)用毛細管吸少量的濾液沿鉛筆線處小心均勻地劃一條濾液細線
濾液劃線
(2)干燥后重復(fù)劃2-3次
(1)向燒杯中倒入3ml層析液(以層析液不沒及濾液細線為準(zhǔn))
紙上層析(2)將濾紙條尖端朝下略微斜靠燒杯內(nèi)壁,輕輕插入層析液中
(3)用培養(yǎng)皿蓋蓋上燒杯
觀察結(jié)果:濾紙條上出現(xiàn)四條寬度、顏色不同的彩帶(如下圖)
最寬:葉綠素a;
最窄:葉綠素b;
相鄰色素帶最近:葉綠素a和葉綠素b;
相鄰色素帶最遠:胡蘿卜素和葉黃素。
六、考點提示:
1、二氧化硅:為了使研磨充分;碳酸鈣:保護色素免受破壞;丙酮:色素的溶劑。
2、擴散最快的是胡蘿卜素(橙黃色),擴散最慢的是葉綠素b(黃綠色)。
3、濾紙上有四條色素帶說明了綠葉中的色素有四種,它們在層析液中的溶解度不同,隨層析液在濾紙上擴散的快慢也不一樣。
4、裁取定性濾紙時,注意雙手盡量不要接觸紙面,以免手上的油脂或其他臟物污染濾紙。
5、制備濾紙條時,要將濾紙條的一端剪去兩角,這樣可以使色素在濾紙條上擴散均勻,便于觀察實驗結(jié)果。
6、根據(jù)燒杯的高度制備濾紙條,讓濾紙條長度高出燒杯25px ,高出的部分做直角彎折。
7、濾紙上的濾液細線如果觸到層析液,細線上的色素就會溶解到層析液中,就不會在濾紙上擴散開來,實驗就會失敗。
8、畫濾液細線時,用力要均勻,速度要適中
9、研磨要迅速、充分。a.因為丙酮容易揮發(fā); b.為了使葉綠體完全破裂.從而能提取較多的色素;c.葉綠素極不穩(wěn)定,能被活細胞中的葉綠素酶水解而被破壞。
基本大歲兄家都說到了相關(guān)的生物實驗研究方法,我就補充一句,寫實驗方案前,你知道自己要研究哪個方向嗎?這很關(guān)鍵,沒啥頭緒的,就去看文獻找靈感看看,因為有些作者會在自己文獻乎判襲的結(jié)尾會給出一些接下來可以做的研究方向,這時候我們就可以“撿漏”,對這個方向去做我們的實驗方案,實驗方案你自己沒有把握的話,也可以找專業(yè)的地方幫你把下關(guān)、優(yōu)化下沖氏,尤其是對于我們這樣的新手,我覺得還是很有必要的。
常用的生物學(xué)研究方法有觀察法和實驗法:
(1)觀察法是科學(xué)探究的一種基本方法.觀察法是在自然狀態(tài)下,研究者按照一定的目的和計劃,用自己的感官外加輔助工卜閉具,對客觀事物進行的感知、考察和描述型坦裂,以發(fā)現(xiàn)和驗證科學(xué)結(jié)論.
(2)實驗法是生物研究的主要方法.是利用特定的器具和材料,通過有目的、有步驟的實驗操作和觀察、記錄分析,發(fā)現(xiàn)或驗證科學(xué)結(jié)論.一般步驟:發(fā)現(xiàn)并提出問題;收集與問題相關(guān)的信信枝息;作出假設(shè);設(shè)計實驗方案;實施實驗并記錄;分析實驗現(xiàn)象;得出結(jié)論.
孟德爾遺傳實驗的科學(xué)方法:
1.提出問題
2.做出假設(shè)
3.設(shè)計實驗
4.進行試驗
5.得出結(jié)論
實驗方法是整個實驗設(shè)計的精髓,是做好實驗設(shè)計的關(guān)鍵所在.現(xiàn)將與中學(xué)實驗有關(guān)的一些最常見的經(jīng)典的實驗方法匯總?cè)缦拢?/p>
(1)化學(xué)物質(zhì)的檢測方法:
①淀粉——碘液
②還原糖——斐林試劑、班氏試劑
③CO2——Ca(OH)2溶液或酸堿指示劑
④乳酸——pH試紙
⑤O2——余燼復(fù)燃
⑥無O2——火焰熄滅
⑦蛋白質(zhì)——雙縮脲試劑
⑧染色體——龍膽紫、醋酸洋紅溶液
⑨DNA——二苯胺試劑
⑩脂肪——蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液
(2)實驗結(jié)果的顯示方法:
①光合速率——O2釋放量或CO2吸收量或淀粉產(chǎn)生量
②呼吸速率——O2吸收量或CO2釋放量或淀粉減少量
③原子途徑——放射性同位素示蹤法
④細胞液濃度大小——質(zhì)壁分離
⑤細胞是否死亡——質(zhì)壁分離
⑥甲狀腺激素作用——動物耗氧量,發(fā)育速度等
⑦生長激素作用——生長速度(體重變化,身高變化)
⑧胰島素作用——動物活動狀態(tài)
⑨菌量——菌落數(shù)或亞甲基藍溶液褪色程度
⑩大腸桿菌——伊紅—美藍瓊脂培養(yǎng)基
(3)實驗條件的控制方法:
①增加水中氧氣——泵入空氣或吹氣或放入綠色植物
②減少水中氧氣——容器密封或油膜覆蓋或用涼開水
③除去容器中CO2——NaOH溶液
④除去葉片中原有淀粉——置于黑暗環(huán)境
⑤除去葉片中葉綠素——酒精隔水加熱
⑥除去光合作用對呼吸作用的干擾——給植株遮光
⑦如何得到單色光——棱鏡色散或彩色薄膜濾光
⑧血液抗凝——加入檸檬酸鈉
⑨線粒體提取——細胞勻漿離心
⑩骨的脫鈣——鹽酸溶液
⑾滅菌方法——微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵在于滅菌,對不同材料,滅菌方法不同:培養(yǎng)基亂兄歲用高壓蒸氣滅菌;接種環(huán)用火焰灼燒滅菌;雙手用肥皂洗凈,擦干后用75%嘩睜酒精消毒;整個接種過程都在實驗室無菌區(qū)進行.
(4)實驗中控制溫度的方法:
①還原糖鑒塵冊定:水浴煮沸加熱
②酶促反應(yīng):水浴保溫
③用酒精溶解葉中的葉綠素:酒精要隔水加熱
④DNA的鑒定:水浴煮沸加熱
⑤細胞和組織培養(yǎng)以及微生物培養(yǎng):恒溫培養(yǎng)