化學(xué)發(fā)光免疫？一、直接化學(xué)發(fā)光免疫分析法 二、間接化學(xué)發(fā)光免疫分析法 三、化學(xué)發(fā)光免疫分析中的特殊技術(shù)類型 接下來對這三類進行 一、直接化學(xué)發(fā)光免疫分析法。這種方法基于化學(xué)發(fā)光物質(zhì)直接與抗原或抗體結(jié)合，形成復(fù)合物后產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光信號的原理。其特點包括靈敏度高、特異性強以及操作簡便等。那么，化學(xué)發(fā)光免疫？一起來了解一下吧。
化學(xué)發(fā)光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA)是一項先進的檢測技術(shù)，將高靈敏度的化學(xué)發(fā)光測定與高特異性的免疫反應(yīng)相結(jié)合，用于抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素和藥物等的檢測。
CLIA技術(shù)是繼放射免疫分析、酶免疫分析、熒光免疫分析和時間分辨熒光免疫分析之后發(fā)展起來的最新免疫測定技術(shù)。它在靈敏度、特異性、快速性和自動化程度方面均表現(xiàn)出色，為醫(yī)學(xué)診斷、科研和工業(yè)應(yīng)用提供了強有力的工具。
CLIA技術(shù)的核心是化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，通過特定的化學(xué)物質(zhì)激發(fā)發(fā)光，其亮度與待測物質(zhì)的濃度成正比，從而實現(xiàn)定量分析。該技術(shù)具有高靈敏度，可以檢測到極低濃度的物質(zhì)，適用于微量檢測。同時，化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的穩(wěn)定性好，不易受外界因素干擾，保證了分析結(jié)果的可靠性。
在免疫反應(yīng)方面，CLIA技術(shù)利用抗原-抗體特異性結(jié)合的原理進行檢測。通過標記抗原或抗體的熒光或化學(xué)發(fā)光物質(zhì)，當與目標物質(zhì)結(jié)合時，產(chǎn)生特定的信號。通過測量信號強度，即可確定待測物質(zhì)的濃度。
CLIA技術(shù)廣泛應(yīng)用于臨床診斷、環(huán)境監(jiān)測、食品安全、藥物研究等領(lǐng)域。例如，在臨床診斷中，可以快速準確地檢測疾病相關(guān)的生物標志物，如腫瘤標記物、激素水平等，為疾病的早期診斷和治療提供依據(jù)。
化學(xué)發(fā)光免疫分析(Chemiluminescence Immunoassay, CLIA)是一種集高靈敏度化學(xué)發(fā)光測定與免疫反應(yīng)特異性于一體的檢測技術(shù)。它專用于檢測各種抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素和藥物等，是繼放射免疫分析、酶免分析、熒光免疫分析和時間分辨熒光免疫分析之后的新型免疫測定技術(shù)，誕生于上世紀70年代中期，由Arakawe首次報道。
經(jīng)過幾十年的發(fā)展，CLIA已經(jīng)成熟并成為一種先進的超微量活性物質(zhì)檢測手段，其應(yīng)用領(lǐng)域日益廣泛。特別是近十年來，該技術(shù)發(fā)展迅速，被認為是當前發(fā)展速度最快、應(yīng)用最廣泛的免疫分析方法。相較于酶免法和熒光法，CLIA的靈敏度和精確度有顯著提升，甚至可以取代放射免疫分析和酶聯(lián)免疫分析，其優(yōu)勢明顯。
CLIA的主要優(yōu)點包括：靈敏度極高，特異性強，試劑成本相對較低，且試劑穩(wěn)定性良好，通?？梢员３?至18個月的有效期。此外，其方法簡便，操作快速，檢測范圍廣泛，且自動化程度不斷提高，易于實施。隨著技術(shù)的進步，高靈敏度的化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)正逐步獲得科研人員的認可，逐漸成為替代傳統(tǒng)生物檢測技術(shù)的首選。
擴展資料
化學(xué)發(fā)光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA),是將具有高靈敏度的化學(xué)發(fā)光測定技術(shù)與高特異性的免疫反應(yīng)相結(jié)合，用于各種抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素和藥物等的檢測分析技術(shù)。
化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)根據(jù)標記方法的不同，主要分為兩種類型：化學(xué)發(fā)光標記免疫分析法和酶標記化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法。
化學(xué)發(fā)光標記免疫分析，也稱為化學(xué)發(fā)光免疫分析(CL IA)，是通過將化學(xué)發(fā)光劑直接標記在抗原或抗體上進行的免疫分析。常用的發(fā)光標記物如吖啶酯類化合物，如Acridinium Ester，其反應(yīng)簡單快速，無需催化劑。標記后的抗原或抗體在特定條件下產(chǎn)生強烈的、瞬時的閃爍發(fā)光，適用于檢測小分子抗原（競爭法）和大分子抗原（夾心法），具有低非特異性結(jié)合和背景噪音的優(yōu)點，提高了靈敏度。
而酶標記化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(CL EIA)，實質(zhì)上是酶免疫分析的延伸，使用酶標記的生物活性物質(zhì)進行免疫反應(yīng)。常見的標記酶有過氧化物酶(HRP)和堿性磷酸酶(ALP)，它們分別與魯米諾和其衍生物如異魯米諾等發(fā)光底物結(jié)合。以HRP為例，其標記的CLEIA過程是酶與魯米諾在堿性緩沖液中進行氧化反應(yīng)，生成激發(fā)態(tài)中間體，當返回基態(tài)時發(fā)出425nm的光。早期直接標記抗原會降低發(fā)光強度，但現(xiàn)代方法如使用過氧化酶標記抗體，再與魯米諾底物結(jié)合，通過酶濃度依賴的發(fā)光反應(yīng)，如Kodak Am erliteTM 半自動分析系統(tǒng)所示，增強了分析的靈敏度和效率。
簡介
發(fā)光現(xiàn)象分為光致發(fā)光、化學(xué)發(fā)光和生物發(fā)光，化學(xué)發(fā)光源自化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的能量，生物發(fā)光在自然界廣泛存在。生物發(fā)光分析始于發(fā)現(xiàn)ATP是螢火蟲熒光素酶催化發(fā)光的輔助因子，從而發(fā)展出定量ATP的方法。化學(xué)發(fā)光反應(yīng)釋放不同強度和壽命的光，涵蓋可見光譜范圍，引發(fā)化學(xué)發(fā)光免疫測定（CLIA）在生命科學(xué)、臨床診斷、環(huán)境監(jiān)測、食品安全和藥物分析等領(lǐng)域獲得關(guān)注。
化學(xué)發(fā)光免疫測定
CLIA基于化學(xué)反應(yīng)發(fā)光強度確定樣品濃度，具有高靈敏度、特異性、廣應(yīng)用范圍、簡易設(shè)備和寬線性范圍。傳統(tǒng)免疫測定需長時間孵化，限制產(chǎn)量和應(yīng)用，快速免疫測定優(yōu)化了質(zhì)量傳輸和反應(yīng)動力學(xué)，縮短分析時間。多分析物免疫傳感系統(tǒng)的高通量、短時、低消耗和低成本，使其近年來非常受歡迎。高靈敏度CLIA成為趨勢，通過減少噪音和提高信號實現(xiàn)。標記材料高特異性和檢測靈敏度至關(guān)重要，魯米諾、吖啶酯鹽等底物在CLIA中廣泛應(yīng)用。
化學(xué)發(fā)光免疫反應(yīng)機制
化學(xué)發(fā)光反應(yīng)產(chǎn)生激發(fā)態(tài)分子，在降至基態(tài)時發(fā)射光。CL反應(yīng)可以是直接或間接的，通過氧化反應(yīng)產(chǎn)生光。魯米諾和吖啶酯鹽具有不同優(yōu)勢，在固體、氣體和液體中廣泛應(yīng)用于實際用途。
化學(xué)發(fā)光標簽的化學(xué)反應(yīng)
化學(xué)發(fā)光免疫反應(yīng)中，標記材料特異性和檢測靈敏度至關(guān)重要。
(1)化學(xué)發(fā)光免疫分析是以發(fā)光物質(zhì)作為標記物，在反應(yīng)體系中發(fā)光物質(zhì)在堿性介質(zhì)中氧化時釋放大量自由能，產(chǎn)生激發(fā)態(tài)的中間體，該激發(fā)態(tài)的中間體由最低振動能級回到穩(wěn)定的基態(tài)、各個振動能級時產(chǎn)生輻射，同時產(chǎn)生能量，多余的能量即為發(fā)射光子，從而產(chǎn)生發(fā)光現(xiàn)象。利用發(fā)光信號的測量儀器，分析接收的光量子產(chǎn)額，通過計算機系統(tǒng)轉(zhuǎn)換成被測物質(zhì)的濃度單位。
(2)化學(xué)發(fā)光免疫分析的類型：①根據(jù)所采用的標記物的不同可分為發(fā)光物標記、酶標記、元素標記化學(xué)發(fā)光免疫分析；②根據(jù)所采用的發(fā)光反應(yīng)的體系不同和標記物的不同分為：化學(xué)發(fā)光免疫分析、化學(xué)發(fā)光酶免疫分析、微粒子化學(xué)發(fā)光免疫分析、電化學(xué)發(fā)光免疫分析。
(3)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)系統(tǒng)中以化學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，化學(xué)發(fā)光的首要條件是吸收了化學(xué)能而處于激發(fā)態(tài)的分子或原子必須能釋放出光子或者能將能量轉(zhuǎn)移到另一個物質(zhì)的分子上并使這種分子激發(fā)，當這種分子回到基態(tài)時釋放出光子。化學(xué)發(fā)光與熒光的根本區(qū)別是形成激發(fā)態(tài)分子的激發(fā)能原理不同。熒光是發(fā)光物質(zhì)吸收了激發(fā)光后使分子產(chǎn)生發(fā)射光，化學(xué)發(fā)光是化學(xué)反應(yīng)過程中所產(chǎn)生的化學(xué)能使分子激發(fā)產(chǎn)生的發(fā)射光。因此，化學(xué)發(fā)光反應(yīng)中反應(yīng)過程必須產(chǎn)生足夠的激發(fā)能是產(chǎn)生發(fā)光效應(yīng)的重要條件。
以上就是化學(xué)發(fā)光免疫的全部內(nèi)容，1、化學(xué)發(fā)光免疫分析，是用化學(xué)發(fā)光劑直接標記抗體或抗原的一類免疫測定方法。目前常見的標記物主要為魯米諾類和吖啶酯類化學(xué)發(fā)光劑。標記物為吖啶酯（雅培）或者ABEI（新產(chǎn)業(yè)）；2、化學(xué)發(fā)光酶免疫分析，是以酶標記生物活性物質(zhì)進行免疫反應(yīng)，免疫反應(yīng)復(fù)合物上的酶再作用于發(fā)光底物，在信號試劑作用下發(fā)光，內(nèi)容來源于互聯(lián)網(wǎng)，信息真?zhèn)涡枳孕斜鎰e。如有侵權(quán)請聯(lián)系刪除。
