分子生物學(xué)簡答題?將提取的植物總RNA或mRNA用變性凝膠電泳分離,則不同的RNA分子將按分子質(zhì)量大小依次排布在凝膠上;將他們?cè)晦D(zhuǎn)移到固定膜上;在適宜的離子強(qiáng)度及溫度條件下,用探針與膜雜交;然后通過探針的標(biāo)記性質(zhì)檢測(cè)出雜交體。若經(jīng)雜交,那么,分子生物學(xué)簡答題?一起來了解一下吧。
《分子生物學(xué)》考試大綱
一、考試科目名稱:《分子生物學(xué)》
二、考試方式: 閉卷
三、考試時(shí)間:120分鐘
四、試卷結(jié)構(gòu):總分100分,選擇題15分(單項(xiàng)選擇5個(gè)小題共5分;多項(xiàng)選擇5個(gè)小題共10分),判斷題12分(6個(gè)小題共12分)、名詞解釋題15分(共5個(gè)小題),簡答題42分(共6個(gè)),論述題16分(共1個(gè))。
五、參考書目
《分子生物學(xué)》(第2版),鄭用璉,高教出版社,2012.02
《分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)》(第1版),吳建祥,李桂新,浙江大學(xué)出版社,2014.07
六、考試的基本要求
分子生物學(xué)主要從生物大分子的水平尤其是核酸水平來闡述生命現(xiàn)象和規(guī)律,內(nèi)容包括核酸分子的分子結(jié)構(gòu)、遺傳信息的傳遞(DNA復(fù)制和突變修復(fù)等)、基因表達(dá)(DNA→RNA→Pr)、表達(dá)調(diào)控、基因重組及分子生物學(xué)技術(shù)等。本課程主要考察學(xué)生對(duì)分子生物學(xué)基本知識(shí)的理解和掌握程度及本學(xué)科知識(shí)在生命科學(xué)研究體系中的重要作用。
七、考試范圍
第1章 緒論
1、分子生物學(xué)的概念
2、分子生物學(xué)的研究內(nèi)容
第2章 基因的概念與結(jié)構(gòu)
1、名詞解釋:核小體、C值、C值矛盾、Tm值、C0t(1/2)值、衛(wèi)星DNA、Alu
序列、轉(zhuǎn)座、轉(zhuǎn)座子、斷裂基因、外顯子、內(nèi)含子、重疊基因、拓?fù)洚悩?gòu)酶、Hoogsteen氫鍵
2、DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)及影響穩(wěn)定性因素
Northern印跡雜交(Northernblot)。這是一種將RNA從瓊脂糖凝膠中轉(zhuǎn)印到硝酸纖維素膜上的方法。DNA印跡技術(shù)由Southern于1975年創(chuàng)建,稱為Southern印跡技術(shù),RNA印跡技術(shù)正好與DNA相對(duì)應(yīng),故被稱為Northern印跡雜交,與此原理相似的蛋白質(zhì)印跡技術(shù)則被稱為Westernblot。Northern印跡雜交的RNA吸印與Southern印跡雜交的DNA吸印方法類似,只是在上樣前用甲基氫氧化銀、乙二醛或甲醛使RNA變性,而不用NaOH,因?yàn)樗鼤?huì)水解RNA的2'-羥基基團(tuán)。RNA變性后有利于在轉(zhuǎn)印過程中與硝酸纖維素膜結(jié)合,它同樣可在高鹽中進(jìn)行轉(zhuǎn)印,但在烘烤前與膜結(jié)合得并不牢固,所以在轉(zhuǎn)印后用低鹽緩沖液洗脫,否則RNA會(huì)被洗脫。在膠中不能加EB,因?yàn)樗鼤?huì)影響RNA與硝酸纖維素膜的結(jié)合。為測(cè)定片段大小,可在同一塊膠上加分子量標(biāo)記物一同電泳,之后將標(biāo)記物切下、上色、照相,樣品膠則進(jìn)行Northern轉(zhuǎn)印。標(biāo)記物膠上色的方法是在暗室中將其浸在含5μg/mlEB的0.1mol/L醋酸銨中10min,光在水中就可脫色,在紫外光下用一次成像相機(jī)拍照時(shí),上色的RNA膠要盡可能少接觸紫外光,若接觸太多或在白熾燈下暴露過久,會(huì)使RNA信號(hào)降低。
在分子水平上的生物學(xué)研究都取得的重要成果
(1)1945年,美國生物學(xué)家比德爾等人用實(shí)驗(yàn)方法揭示了基因和酶的關(guān)系。
(2)關(guān)于DNA是攜帶遺傳信息載體的發(fā)現(xiàn)。
(3)DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的建立。DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的發(fā)現(xiàn),被稱為是二十世紀(jì)生物學(xué)最偉大的發(fā)現(xiàn),是分子生物學(xué)誕生的標(biāo)志
第二章
一1基因:是編碼一條多肽鏈或功能RNA(tRNA,rRNA,snRNA等)所必需的全部核苷酸序列.
2基因組:指某一特定生物單倍體染色體的數(shù)目及其所攜帶的全部基因.
3DNA的C值與C值矛盾:一個(gè)單倍體基因組的DNA含量(bp)總是恒定的,稱為該物種DNA的C值;形態(tài)學(xué)的復(fù)雜程度與C值大小不一致的現(xiàn)象稱C值矛盾或C值悖理.
4多順反子mRNA:如果為兩條以上的不同肽鏈編碼的mRNA稱為多順反子mRNA(或原核生物DNA序列中功能相關(guān)的基因,往往叢集在基因組的一個(gè)或幾個(gè)特定部位,形成一個(gè)功能單位或轉(zhuǎn)錄單位,它們可以被一起轉(zhuǎn)錄為含多個(gè)基因的mRNA分子,稱為多順反子 mRNA.)
5單順反子mRNA:如果只為一條肽鏈編碼則這種mRNA稱為單順反子mRNA;
6常染色質(zhì)與異染色質(zhì):在細(xì)胞核的大部分區(qū)域,染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的折疊壓縮程度比較小,即密度較低,進(jìn)行細(xì)胞染色時(shí)著色較淺,這部分染色質(zhì)成常染色質(zhì). 著絲點(diǎn)部位的染色質(zhì)絲,在細(xì)胞間期就折疊壓縮的非常緊密,和細(xì)胞分裂時(shí)的染色體情況差不多,即密度較高,細(xì)胞染色時(shí)著色較深,這部分染色質(zhì)稱異染色質(zhì).
7基因家族:真核生物的基因組中有許多來源相同,結(jié)構(gòu)相似,功能相關(guān)的基因,這樣的異族基因稱為基因家族.
8Alu序列:Alu序列是在人和某些哺乳動(dòng)物中存在的約為300bp的片斷,由于該片斷含有一個(gè)限制性內(nèi)切酶Alu I的酶切位點(diǎn)而得名.
9蛋白質(zhì)組學(xué):研究細(xì)胞內(nèi)全部蛋白質(zhì)的存在及其活動(dòng)方式的一門科學(xué),從研究單個(gè)蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)與功能進(jìn)入研究蛋白質(zhì)群體(組)的結(jié)構(gòu)與功能.
10生物信息學(xué):是將生物遺傳密碼與電腦信息相結(jié)合,通過各種程序計(jì)算分析核酸,蛋白質(zhì)等生物大分子的序列,揭示遺傳信息,并通過查詢,搜索,比較,分析生物信息,理解生物大分子信息的生物學(xué)意義.
二.1.原核生物基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn):
(1),結(jié)構(gòu)簡煉;(2),存在轉(zhuǎn)錄單元;(3)操縱子調(diào)節(jié);(4)有重疊基因.
2.真核生物基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn):
1),基因組很大;2),有大量重復(fù)序列;3),有斷裂基因;4),形成簇的基因家族;5),DNA上有多數(shù)不編碼序列.
3.真核生物的重復(fù)序列有那些類型?
1),單一序列,又稱非重復(fù)序列;2),輕度重復(fù)序列;3),中度重復(fù)序列;4),高度重復(fù)序列.
第三章 DNA的復(fù)制
一.1滾環(huán)式復(fù)制:某些病毒或細(xì)菌的雙鏈環(huán)狀DNA或以某種方式轉(zhuǎn)變的雙鏈環(huán)狀DNA,在復(fù)制時(shí)由對(duì)正鏈復(fù)制原點(diǎn)處進(jìn)行單鏈特異性切割,所形成的5’端即從雙股DNA置換出來,并為SSB所覆蓋.這時(shí)的DNA聚合酶III以3’-OH為引物,以負(fù)鏈為模板,從3’-OH基端逐步增添脫氧核苷酸,隨著復(fù)制的進(jìn)行,5’端長度即不斷增加,這一過程中,單鏈尾巴的延伸伴隨著雙鏈DNA的繞軸轉(zhuǎn)動(dòng),故稱為滾環(huán)式復(fù)制.
2D環(huán)復(fù)制: 線粒體DNA的雙股鏈由于浮力密度的不同而分為輕鏈(L鏈)和重鏈(H鏈),它有兩個(gè)單向復(fù)制叉,倆條鏈的復(fù)制原點(diǎn)不再同一點(diǎn)上,而且兩個(gè)復(fù)制原點(diǎn)的激活有先有后,復(fù)制從H鏈的原點(diǎn)開始,以L鏈為模板,新合成的H 鏈即轉(zhuǎn)換為原來的 H鏈,所形成的結(jié)構(gòu)為取代環(huán),或D-環(huán),故稱D換復(fù)制.
3單復(fù)制子:原核生物和線粒體DNA分子都只含有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn),即單復(fù)制子.
4DNA呼吸作用:DNA雙鏈中,氫鍵不斷斷裂和再生的過程。
分子生物學(xué)試題(一)
一、名詞解釋:(每題3分,共30分)
1、物理圖譜
指應(yīng)用限制性核酸內(nèi)切酶,將DNA分子降解成大小不同的片段,再將這些片段排列成一定順序的圖譜。
2、SSB
可與DNA單鏈相結(jié)合防止核酸酶對(duì)DNA的水解及防止DNA單鏈重新構(gòu)成雙鏈并使前端DNA雙螺旋的穩(wěn)定性降低、易于解開的蛋白質(zhì)。
3、斷裂基因
是指真核生物的基因是由編碼序列和非編碼序列構(gòu)成的,編碼序列被非編碼序列分割開來。
4、同源重組
、是指減數(shù)分裂過程中同源染色體間的遺傳物質(zhì)的交換。重組對(duì)之間具有同源性。
5、trans-acting element
、調(diào)節(jié)蛋白通過擴(kuò)散結(jié)合于細(xì)胞內(nèi)的多個(gè)靶位點(diǎn),發(fā)生突變后將同時(shí)影響不同染色體上等位基因的表達(dá),這種作用為反式作用,這些調(diào)節(jié)蛋白即稱為反式作用因子。
6、反義RNA
為載體,即基因載體或稱克隆載體、,是在基因工程中為“攜帶”感興趣的外源DNA、實(shí)現(xiàn)外源DNA的無性繁殖或表達(dá)有意義的蛋白質(zhì)所采用的一些DNA分子,具有自我復(fù)制和表達(dá)功能。
7、母源影響基因
、是指果蠅在個(gè)體發(fā)育中,其身體極性的分化受到來源于母本的撫育細(xì)胞、濾泡細(xì)胞、和脂肪體細(xì)胞的基因的影響,這些被輸入到卵母細(xì)胞的基因稱為母源影響基因,對(duì)卵子的發(fā)育有重大影響。
以上就是分子生物學(xué)簡答題的全部內(nèi)容,10、功能基因組學(xué)是依附于對(duì)DNA序列的了解,應(yīng)用基因組學(xué)的知識(shí)和去了解影響發(fā)育和整個(gè)生物體的特定序列表達(dá)譜。二、是非題(對(duì)的打“√”,錯(cuò)的打“Ⅹ”;每題1分,共10分)1、編碼區(qū)以外的突變不會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞或生物體表型改變。