真核生物轉(zhuǎn)錄過(guò)程?1 轉(zhuǎn)錄起始階段 大腸桿菌的RNA聚合酶中的THITA亞基識(shí)別基因上游的啟動(dòng)子,使聚合酶全酶與啟動(dòng)子結(jié)合并形成復(fù)合體,BETA'亞基結(jié)合雙鏈DNA使之解開(kāi),BETA亞基結(jié)合核苷三磷酸并催化磷酸二酯鍵形成,那么,真核生物轉(zhuǎn)錄過(guò)程?一起來(lái)了解一下吧。
1、真核生物所轉(zhuǎn)錄的rna往往需要經(jīng)過(guò)一系列的加工才能成頃拍顫為成熟的mrna,加工過(guò)程包括:鏈的裂解、5’和3’端的切除和特殊結(jié)構(gòu)的形成、堿基修飾以及拼接(splicing)等過(guò)程。(1)真核生物mrna前體的加工hnrna轉(zhuǎn)變?yōu)閙rna的加工過(guò)程包括:1、5’
端形成特殊的帽子結(jié)構(gòu)
m7g5’ppp5’
np-2、在3’
端切斷并加上一個(gè)poly(a)的
尾巴.(2)trna的加工1.
rnase通過(guò)賀枯trna剪接反應(yīng)除去內(nèi)含子。2.對(duì)某些trna通過(guò)核苷酸基轉(zhuǎn)移酶加上末端cca序列。3.進(jìn)雀敗行特異堿基修飾。(3)初始
rrna加工
大腸桿菌中在單一的轉(zhuǎn)錄本內(nèi)就含有7個(gè)rrna基因的拷貝。初級(jí)轉(zhuǎn)錄物大約含有6500個(gè)核苷酸,編碼23s和16s
rrna,同時(shí)還編碼著幾種trna和小的5
s
rrna。
分子克隆和核酸測(cè)序表明,23
s
rrna大約含有2900核苷酸,而16s
rrna大約含有1600核苷酸。將初始轉(zhuǎn)錄物加工成23
s
rrna和16s
rrna需要特異的核酸酶(rnases)催化。
真核生物轉(zhuǎn)錄起始由RNA聚合酶在許多通用轉(zhuǎn)念改喚錄因子(GTF)的幫助下完成。具體過(guò)程是GTF中的TFIID蛋白首先識(shí)別TATA BOX(TATA BOX 是真核生物核心啟動(dòng)子的的重要元件)并結(jié)合上去,其結(jié)合導(dǎo)致TATA序列扭曲,這有利于聚合酶以及其他GTF募集到啟動(dòng)子上,最終聚合酶以及通用轉(zhuǎn)錄因子共同結(jié)合在啟動(dòng)子上形成前起始復(fù)合體。
前起始復(fù)合體形成之后,要開(kāi)始轉(zhuǎn)錄還需要“逃離”啟動(dòng)子。真核轉(zhuǎn)錄逃離啟殲亂動(dòng)子首先與原核類(lèi)似的是先有流產(chǎn)性轉(zhuǎn)錄,此外仔凱是原核所沒(méi)有的聚合酶“尾巴”磷酸化,磷酸化尾巴幫助聚合酶擺脫轉(zhuǎn)錄時(shí)所用的大部分通用轉(zhuǎn)錄因子,并在逃離啟動(dòng)子時(shí)將他們丟下。逃離啟動(dòng)子后即形成包含了酶、DNA、RNA的穩(wěn)定的三重復(fù)合體也即延伸復(fù)合體。至此完成轉(zhuǎn)錄起始的全過(guò)程。
參考 MOLECULAR BIOLOGY OF THE GENE
1 轉(zhuǎn)錄起始階段
大腸桿菌的RNA聚合酶中的THITA亞基識(shí)別基因上游的啟動(dòng)子,使聚合酶全酶與啟動(dòng)子結(jié)合并形槐喚成復(fù)合體,BETA'亞基結(jié)合雙鏈DNA使之解開(kāi),BETA亞基結(jié)合核苷三磷酸并催化磷酸二酯鍵形成,連接8至9個(gè)核苷酸后THITA亞基脫落
2延長(zhǎng)階段
按3-5方向進(jìn)散兄行,已轉(zhuǎn)錄的DNA鏈重新結(jié)鉛掘凱合,將轉(zhuǎn)錄的不斷解旋
3 終止階段
1)ROU因子依賴(lài)性終止:ROU因子在終止位點(diǎn)與解旋酶結(jié)合,促使其脫離DNA;
2)非ROU因子依賴(lài)性結(jié)合:在終止位點(diǎn)已形成的MRNA鏈形成發(fā)夾結(jié)構(gòu),可能改變了聚合酶構(gòu)象,使酶不能前進(jìn),轉(zhuǎn)錄終止。
mRNA轉(zhuǎn)錄加工
【加帽】
即在mRNA的5'-端加上m7GTP的結(jié)構(gòu)。此過(guò)程發(fā)生在細(xì)胞核內(nèi),即對(duì)HnRNA進(jìn)行加帽。加工過(guò)程首先是在磷酸酶的作用下,將5'-端的磷酸基水解,然后再加上鳥(niǎo)苷三磷酸,形成GpppN的結(jié)構(gòu),再對(duì)G進(jìn)行甲基化。
【加尾】
這一過(guò)程也是細(xì)胞核內(nèi)完成,首先由核酸外切酶切去3'-端一些過(guò)剩的核苷酸,然后再加入polyA。
【剪接】
真核生物中的結(jié)構(gòu)基因基本上都是斷裂基因。結(jié)構(gòu)基因中能夠指導(dǎo)多肽鏈合成的編碼順序被稱(chēng)為外顯子,而不能指導(dǎo)多肽鏈合成的非編碼順序就被稱(chēng)為內(nèi)含子。真核生物HnRNA的剪接一般需snRNA參與構(gòu)成的核蛋白體參加,通過(guò)形成套索狀結(jié)構(gòu)而將內(nèi)含子切除掉。
【內(nèi)部甲基化】
由甲基化酶催化,局纖對(duì)某些堿基進(jìn)行甲基化處理。
折疊編輯本段tRNA轉(zhuǎn)錄加工
主要加工方式是切斷和堿基修飾。
真核生物tRNA前體一般無(wú)生物學(xué)特性,需要進(jìn)行加工修飾。加工過(guò)程包括:
(1)剪切和拼接
tRNA前體在tRNA剪切酶作用下,切成一定大小的分子。大腸桿菌RnaseP特異切割tRNA前體5′旁側(cè)序列,3′-核酸內(nèi)切酶如RnaseF可將tRNA前體3′端一段序列切下來(lái)。RnaseD可水解3′端多余核甘酸。
1、轉(zhuǎn)錄起始水平。這一環(huán)節(jié)是調(diào)控的最主要環(huán)節(jié),由對(duì)基因轉(zhuǎn)錄活性的調(diào)控來(lái)完成,包括基因的空間結(jié)構(gòu)、折疊狀態(tài)、DNA上的調(diào)控序列、與調(diào)控因子的相互作用等。a.活化染色質(zhì):在真核生物體內(nèi),RNApol與啟動(dòng)子的結(jié)合受染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的限制,需通過(guò)染色質(zhì)重塑來(lái)活化轉(zhuǎn)錄。常態(tài)下,組蛋白可使DNA鏈形成核小體結(jié)構(gòu)而抑制其轉(zhuǎn)錄,轉(zhuǎn)錄因子若與轉(zhuǎn)錄區(qū)結(jié)合則基因具有轉(zhuǎn)錄活性。因而基礎(chǔ)水平的轉(zhuǎn)錄是限制性的,核小體的解散時(shí)必要前提,組蛋白與轉(zhuǎn)錄因子之間的競(jìng)爭(zhēng)結(jié)果可以決定是否轉(zhuǎn)錄。組蛋白的抑制能力可因其乙酰化而降低。另外,由于端粒位置效應(yīng)或中心粒的緣故,抑或是收到一些蛋白的調(diào)控,真核生物細(xì)胞可能出現(xiàn)10%的異染色質(zhì),異染色質(zhì)空間上壓縮緊密,不利于轉(zhuǎn)錄。b.活化基因:真核生物編碼蛋白的基因含啟動(dòng)子元件和增強(qiáng)子元件(啟動(dòng)子:在DNA分子中,RNA聚合酶能夠識(shí)別、結(jié)合并導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄起始的序列。增強(qiáng)子:指能使與它連鎖的基因轉(zhuǎn)錄頻率明顯增加的DNA序列。),轉(zhuǎn)錄因子與啟動(dòng)子元件相互作用調(diào)節(jié)基因表達(dá);轉(zhuǎn)錄激活因子與增強(qiáng)子元件相互作用,再通過(guò)與結(jié)合在啟動(dòng)子元件上的轉(zhuǎn)錄因子相互作用來(lái)激活轉(zhuǎn)錄。兩種元件以相同的機(jī)制作用于轉(zhuǎn)錄。真核生物RNApol對(duì)啟動(dòng)子親和力很小或沒(méi)有,轉(zhuǎn)錄起始依賴(lài)于多個(gè)轉(zhuǎn)變路激活因子的作用,而若干個(gè)調(diào)節(jié)蛋白與特定DNA序列的結(jié)合大大提高了活化的精確度團(tuán)山,無(wú)疑是這一作用機(jī)制的一大優(yōu)勢(shì)。
以上就是真核生物轉(zhuǎn)錄過(guò)程的全部?jī)?nèi)容,即在mRNA的5'-端加上m7GTP的結(jié)構(gòu)。此過(guò)程發(fā)生在細(xì)胞核內(nèi),即對(duì)HnRNA進(jìn)行加帽。加工過(guò)程首先是在磷酸酶的作用下,將5'-端的磷酸基水解,然后再加上鳥(niǎo)苷三磷酸,形成GpppN的結(jié)構(gòu),再對(duì)G進(jìn)行甲基化。