微生物檢驗(yàn)方法?血清學(xué)試驗(yàn) 可用于檢查鼠疫耶爾森菌抗原或特異性抗體。敏感而特異的試驗(yàn)方法有ELISA、固相放射免疫分析,SPA協(xié)同凝集試驗(yàn)等。檢測(cè)核酸 用DNA探針雜交方法或PCR技術(shù)檢測(cè)鼠疫耶爾森菌核酸,有助于鼠疫的診斷。PCR敏感性極高,那么,微生物檢驗(yàn)方法?一起來(lái)了解一下吧。
微生物森信檢的最多的是菌落總數(shù)和大腸菌群,此外還有致并春陸病菌的檢測(cè),如絕頃沙門(mén)氏菌、金葡萄球菌、阪崎腸桿菌、致病菌大腸桿菌、志賀氏菌等等。
主要是一般微悉巧舉睜碧生物如細(xì)菌總數(shù)、霉菌和酵母計(jì)數(shù)檢測(cè),還有致病菌檢測(cè),如金黃色葡寬耐萄球菌,沙門(mén)氏菌,綠膿桿菌等
微生物學(xué)檢查法
標(biāo)本
因鼠疫傳染性極強(qiáng),采集標(biāo)本時(shí)必須嚴(yán)格無(wú)虧明菌操作。根據(jù)病型采取淋巴結(jié)穿刺液、腫脹部位組織液、膿汁,血液和痰等。人和動(dòng)物尸體可取肝、脾、肺、病變淋巴結(jié)以及心血等。陳舊尸體取骨髓。將采集標(biāo)本好空或送至有嚴(yán)密防護(hù)措施的專門(mén)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢查,禁止在一般實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行操作。
直接涂片鏡檢
除血液標(biāo)本外,一般均需涂片或印片,干燥后用甲醇固定,革蘭染色或呂氏美蘭染色,鏡檢。在不同材料中,菌體大小、形態(tài)有很大差異,除典型形態(tài)外,往往可見(jiàn)菌體呈多形態(tài)性,需加以注意。
分離培養(yǎng)與鑒定
血液標(biāo)本需先置肉湯中進(jìn)行增菌培養(yǎng)。分離培養(yǎng)一般選用血瓊脂平板,28攝氏度24小時(shí)后,可見(jiàn)較小的露滴狀菌落,繼續(xù)培養(yǎng)則菌落增大至1~2毫米,中央厚而致密,周邊逐漸變薄。取可疑菌落進(jìn)行涂片染色鏡檢,噬菌體裂解試驗(yàn),血清凝集試驗(yàn),特異熒光抗體染色等作出鑒訂。
血清學(xué)試驗(yàn)
可用于檢查鼠疫耶爾森菌抗原或特異性抗體。敏感而特異的試驗(yàn)方法有ELISA、固相放射免疫分析,SPA協(xié)同凝集試驗(yàn)等友伍。
檢測(cè)核酸
用DNA探針雜交方法或PCR技術(shù)檢測(cè)鼠疫耶爾森菌核酸,有助于鼠疫的診斷。PCR敏感性極高,蚤體內(nèi)有10個(gè)鼠疫耶爾森菌感染即可用PCR技術(shù)檢出。
病原微生物中細(xì)菌常見(jiàn)檢測(cè)方法有哪些
病原微生物種類(lèi)繁多,變異迅速,快速鑒定病原微生物的檢驗(yàn)技術(shù)也在不斷發(fā)展前進(jìn)著。目前,應(yīng)用比較廣泛的病原微生物檢測(cè)方法主要有直接涂片鏡檢、分離培養(yǎng)、生化反應(yīng)、血清學(xué)反應(yīng)、核酸分子雜交、基因晶片、多聚酶鏈反應(yīng)等,該文對(duì)這些檢測(cè)技術(shù)進(jìn)展做一綜述。 對(duì)人和動(dòng)物具有致病性的微生物稱為病原微生物,又稱病原體塌陸,有病毒、細(xì)菌、立克次體、支原體、衣原體、螺旋體、真菌、放線菌、朊粒等。這些病原微生物可引起感染、過(guò)敏、腫瘤、癡呆等疾病,也是危害食品安全的主要因素之一。近年來(lái)出現(xiàn)的SARS、高致病性禽流感、西尼羅病毒感染等疾病的傳染性極強(qiáng),往往造成世界性大流行,因此對(duì)病原體的檢測(cè)必須做到快速、準(zhǔn)確。常規(guī)病原學(xué)檢測(cè)方法操作繁瑣,檢測(cè)周期長(zhǎng),而且對(duì)操作人員技術(shù)水平要求比較高。隨著拍衫洞醫(yī)學(xué)微生物學(xué)研究技術(shù)的不斷發(fā)展,病原學(xué)診斷已不再局限于病原體水平,深入到分子水平、基因水平的檢測(cè)手段不斷出現(xiàn)并被應(yīng)用于臨床和實(shí)驗(yàn)室 J。核酸分子雜交技術(shù)、PCR技術(shù)、基因晶片技術(shù)等檢測(cè)方法,自動(dòng)化程度高,快速省時(shí)、無(wú)污染、結(jié)果精確,可以準(zhǔn)確靈敏地鑒定病原微生物。1 傳統(tǒng)的病原微生物的檢測(cè)方法傳統(tǒng)的病原微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室檢查以染色、培養(yǎng)、生化鑒定等為主,將標(biāo)本直接涂片染色鏡檢和接種在培養(yǎng)基上進(jìn)行分離培養(yǎng)是對(duì)細(xì)菌或真菌感染性疾病進(jìn)行病原學(xué)診斷的常用方法。
一、生長(zhǎng)量測(cè)定法
1.1體積測(cè)量法:又稱測(cè)菌絲濃度法。
通過(guò)測(cè)定一定體積培養(yǎng)液中所含菌絲的量來(lái)反映微生物的生長(zhǎng)狀況。方法是,取一定量的待測(cè)培養(yǎng)液(如10毫升)放在有刻度的離心管中,設(shè)定一定的離心時(shí)間(如5分鐘)和轉(zhuǎn)速(如5000rpm),離心后,倒出上清夜,測(cè)出上清夜體積為v,則菌絲濃度為(10-v)/10。菌絲濃度測(cè)定法是大規(guī)模工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)上微生物生長(zhǎng)的一個(gè)重要監(jiān)測(cè)指標(biāo)。這種方法比較粗放,簡(jiǎn)便,快速,但需要設(shè)定一致的處理?xiàng)l件,否則偏差很大,由于離心沉淀物中夾雜有一些固體營(yíng)養(yǎng)物,結(jié)果會(huì)有一定偏差。
1.2稱干重法:
可用離心或過(guò)濾法測(cè)定。一般干重為濕重的10-20%。在離心法中,將一定體積待測(cè)培養(yǎng)液倒入離心管中,設(shè)定一定的離心時(shí)間和轉(zhuǎn)速,進(jìn)行離心,并用清水離心洗滌1-5次,進(jìn)行干燥。干燥可用烘箱在105℃或100℃下烘干,或采用紅外線烘干,也可在80℃或40℃下真空干燥,干燥后稱重。如用過(guò)濾法,絲狀真菌可用濾紙過(guò)濾,細(xì)菌可用醋酸纖維膜等濾膜過(guò)濾,過(guò)濾后用少量水洗滌,在40℃下進(jìn)行真空干燥。
以上就是微生物檢驗(yàn)方法的全部?jī)?nèi)容,對(duì)于絲狀真菌和一些放線菌,可以在培養(yǎng)基上測(cè)定一定時(shí)間內(nèi)菌絲生長(zhǎng)的長(zhǎng)度,或是利用一只一端開(kāi)口并帶有刻度的細(xì)玻璃管,到入合適的培養(yǎng)基,臥放,在開(kāi)口的一端接種微生物,一段時(shí)間后記錄其菌絲生長(zhǎng)長(zhǎng)度,借此衡量絲狀微生物的生長(zhǎng) 二、。