目錄化學(xué)發(fā)光免疫分析優(yōu)缺點(diǎn) 化學(xué)發(fā)光分析儀檢測原理 化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)的基本原理 化學(xué)發(fā)光檢測原理及流程 生物發(fā)光免疫分析原理
化學(xué)發(fā)光免疫分析儀是通過檢測患者血清從而對(duì)人體進(jìn)行免疫分析的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)儀器。將定量的患者血清和辣根過氧化物（HRP）加入到固相包被有抗體的白色不透明微孔板中，血清中的待測分子與辣根過氧化物酶的結(jié)合物和固相載體上的抗體特異性結(jié)合。分離洗滌未反應(yīng)的游離成分。然后，加入魯米諾Luminol發(fā)光底液 ，利用化學(xué)反應(yīng)釋放的自由能激發(fā)中間體，從基態(tài)回到激發(fā)態(tài)，能量以光子的形式釋放。此時(shí)，將微孔板置入分析儀內(nèi)，通過儀器內(nèi)部的三維傳動(dòng)，依次由光子計(jì)數(shù)明皮器讀出各孔的光子數(shù)。樣品中的待喚差測分子濃度根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和槐皮建立的數(shù)學(xué)模型進(jìn)行定量分析。最后，打印數(shù)據(jù)報(bào)告，以輔助臨床診斷。
化學(xué)發(fā)光免疫禪友分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA),是將具有高靈敏度的化學(xué)發(fā)光測定技術(shù)與高特異性的免棗歷疫反應(yīng)賀巖槐相結(jié)合，用于各種抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素和藥物等的檢測分析技術(shù)。是繼放免分析、酶免分析、熒光免疫分析和時(shí)間分辨熒光免疫分析之后發(fā)展起來的一項(xiàng)最新免疫測定技術(shù)。
化學(xué)發(fā)光是利用化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的能量促使產(chǎn)生能級(jí)躍遷，從而發(fā)光，典型的如魯米諾檢測血跡；
熒光是一種光致發(fā)光現(xiàn)象，必須提供光源去激發(fā)分子產(chǎn)生能級(jí)躍遷，進(jìn)而發(fā)光。
使用上述兩種方法進(jìn)行免疫分析時(shí)，其區(qū)別配鏈很明顯，化學(xué)發(fā)光無需外加光源，背景干擾??；而熒光則需要外加光源，在垂直光源的方向上檢測，生物樣品中的蛋白質(zhì)、氨基酸等分子也會(huì)產(chǎn)仿輪生背景熒光，背景稍高一些，需要選擇培大孫合適的熒光試劑，以及樣品處理方法以減少非特異性吸附蛋白的影響。
化學(xué)發(fā)光的原理是,激發(fā)態(tài)的分子經(jīng)過結(jié)合、光解和重新結(jié)合的化學(xué)反應(yīng),能量從激發(fā)態(tài)轉(zhuǎn)變到燃和基態(tài),從而發(fā)出光。
關(guān)于化學(xué)發(fā)光檢測原理，化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫分析又稱化學(xué)發(fā)光免知手疫分析,是用化學(xué)發(fā)光劑直接標(biāo)記抗原或抗體的免疫分析儀器。
在這種反應(yīng)中,激發(fā)態(tài)的分子可以通過自發(fā)熒光,吸收光能,再釋放出大量的可見皮猛盯光來實(shí)現(xiàn)發(fā)光。
當(dāng)光子發(fā)出后，化學(xué)發(fā)光免疫分析儀器中核心探測器件也就是光電倍增管，由單光子檢測并傳輸至放大器，并加高壓電流放大，放大器將模擬電流轉(zhuǎn)化為數(shù)字電流，數(shù)字電流將發(fā)光信號(hào)由R232數(shù)據(jù)線傳輸給電腦并加以計(jì)算，得出臨床結(jié)果。
而免疫反應(yīng)是將發(fā)光物質(zhì)直接標(biāo)記在抗原（化學(xué)發(fā)光免疫分析） 或抗體（免疫化學(xué)發(fā)光分析）上或酶作用于發(fā)光底物。
而關(guān)于免疫反應(yīng)體系這里必須講清楚，抗原抗體反應(yīng)，這個(gè)里面是有未知和已知的關(guān)系，如果待測物是測抗原，則抗體是已經(jīng)知道的，如果待測物是測抗體那抗原是已知的。
而前面已經(jīng)講了化學(xué)發(fā)光現(xiàn)象，簡單的講就是光信號(hào)的強(qiáng)度和待測物濃度是成一定正比關(guān)系的，或者是可以通過，相關(guān)關(guān)系式換算出來的。
1、直接化學(xué)發(fā)光，標(biāo)記尺型物為吖啶酯（雅培）或者abei（新產(chǎn)業(yè)）
2、酶促化學(xué)發(fā)光，標(biāo)記物為堿性磷酸酶（廈門波生）或者辣根過氧化物酶（強(qiáng)生）
3、電化學(xué)發(fā)光，標(biāo)記物燃輪為三聯(lián)吡啶釕（羅氏陵段猜）
括號(hào)內(nèi)為代表廠家
