微生物分離純化的方法?1、篩選法 篩選法是一種常用的微生物分離純化方法,它利用不同微生物的生理生化特性,通過對不同培養基的篩選,選擇出目標微生物。這種方法適用于微生物數量較多的情況下,可以快速篩選出目標微生物。2、純培養法 純培養法是一種將目標微生物從混合菌群中分離出來的方法。那么,微生物分離純化的方法?一起來了解一下吧。
1. 劃線平板接種法:這種方法使用接種環在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續劃線。隨著劃線次數的增加,微生物細胞數量將減少并逐步分散開來。如果劃線適宜,微生物能一一分散,經培養后,在平板表面得到單菌落。該方法主要用于細菌分離和純化。
2. 涂布平板法:這種方法先將待分離的材料用無菌水作一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養基表面進行培養。當稀釋倍數足夠高時,可以獲得單個細菌形成的菌落。該方法主要用于活菌計數和觀察菌落特征。
3. 稀釋倒平板法(澆注平板法):這種方法先將待分離的材料用無菌水作一系列的梯度稀釋,然后分別取不同稀釋液少許,與已熔化并冷卻至45℃左右的瓊脂培養基混合,搖勻后,傾入滅過菌的培養皿中,待瓊脂凝固后,制成可能含菌的瓊脂平板。如果稀釋得當,在平板表面或瓊脂培養基中就可出現分散的單個菌落。該方法主要用于微生物的分離和純化。
1.富集培養,取約一克樣品,加入裝有富集培養基的三角瓶中置于80—90攝氏度水域加熱10到20分鐘然后經三十攝氏度振蕩培養
2初篩平板選擇處理將培養液再經一次熱處理,適當稀釋后,取0.1毫升涂布在選擇培養基上30度培養
主要有
1、稀釋倒平板法
首先把微生物懸液作一系列的稀釋(如1:10、1:100、1:1000、1:10000),然后分別取不同稀釋液少許,與已熔化并冷卻至50℃左右的瓊脂培養基混合,搖勻后,傾入滅過菌的培養皿中,待瓊脂凝固后制成可能含菌的瓊脂平板,保溫培養一定時間即可出現菌落。如果稀釋得當,在平板表面或瓊脂培養基中就可出現分散的單個菌落,這個菌落可能就是由一個細菌細胞繁殖形成的。隨后挑取該單個菌落,或重復以上操作數次,便可得到純培養。
2.、稀釋涂布平板法
將已熔化的培養基倒入無菌平皿,制成無菌平板,冷卻凝固后,將一定量的微生物懸液滴加在平板表面,再用無菌玻璃涂棒將菌液均勻分散至整個平板表面,經培養后挑取單個菌落。
3、平板劃線法
將微生物樣品在固體培養基表面多次作“由點到線”稀釋而達到分離。
4、稀釋搖管法
先將一系列盛無菌瓊脂培養基的試管加熱使瓊脂熔化后冷卻并保持在50℃左右,將待分離的材料用這些試管進行梯度稀釋,試管迅速搖動均勻,冷凝后,在瓊脂柱表面傾倒一層滅菌液體石蠟和固體石蠟的混合物,將培養基和空氣隔開。
主要有1.劃線法
2.倒平板法
3.涂布法
根據分離的菌種選擇不同的培養基
稀釋混合倒平板法、稀釋涂布平板法、平板劃線分離法、稀釋搖管法、液體培養基分離法、單細胞分離法、選擇培養分離法等。其中前三種方法最為常用,不需要特殊的儀器設備, 分離純化效果好。
從混雜微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過程稱為微生物分離與純化。在分子生物學的研究及應用中,不僅需要通過分離
從混雜微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過程稱為微生物分離與純化。在分子生物學的研究及應用中,不僅需要通過分離純化技術從混雜的天然微生物群中分離出特定的微生物,而且還必須隨時注意保持微生物純培養物的“純潔”,防止其他微生物的混入。
1、用固體培養基分離和純化
單個微生物在適宜的固體培養基表面或內部生長、繁殖到一定程度可以形成肉眼可見的、有一定形態結構的子細胞生長群體,稱為菌落。當固體培養基表面眾多菌落連成一片時,便成為菌苔。不同微生物在特定培養基上生長形成的菌落或菌苔一般都具有穩定的特征,可以成為對該微生物進行分類、鑒定的重要依據。大多數細菌、酵母菌、以及許多真菌和單細胞藻類能在固體培養基上形成孤立的菌落,采用適宜的平板分離法很容易得到純培養。
1、先根據目的菌株的生長特性從環境中采集樣品
2、將樣品加入無菌水中,振蕩使菌均勻分布
3、采用梯度稀釋法,選取合適的梯度值于平板上培養
4、挑取目的菌進行平板劃線分離即可
以上就是微生物分離純化的方法的全部內容,分離:稀釋倒平皿法 平板劃線法 單細胞挑取法 利用選擇培養基分離法 純化:1.若是你不知道你所要純化的微生物的特征,最簡單的不知道它的菌落特征和形態大小,那現根據你要分離菌的特性,找適合的初篩培養基,找到你要純化的菌。如纖維素菌,你在培養基中加纖維素粉或CMC-Na作碳源。