生物素標記試劑盒?產品介紹:超級生物素快速標記試劑盒為用戶提供全面的生物素標記解決方案,適用于蛋白、抗體、多肽等大分子的伯氨基(NH2-)標記。產品特點:1. 優化的生物素連接臂設計,減少空間位阻,適用于細胞表面標記。2. 簡單的操作流程,無需額外試劑準備。3. 短時間完成標記過程,僅需90分鐘。那么,生物素標記試劑盒?一起來了解一下吧。
ChIRP試劑盒是一種用于研究哺乳動物細胞或組織中lncRNA、circRNA、蛋白與DNA相互作用的實驗工具。其原理是通過設計與目標RNA序列互補的生物素探針,將目標RNA與與其共同作用的DNA染色體片段吸附到鏈霉親和素磁珠上,然后通過qRT-PCR、測序、Western或質譜分析測定目標RNA、DNA序列或蛋白。該方法在全基因范圍內定位lncRNA/circRNA結合位點,揭示其在細胞核內的生物學機制。試劑盒內含高特異性和靈敏度的優化試劑,可降低非特異性背景,提高實驗成功率。適用于研究lncRNA與DNA、RNA及蛋白質之間的互作,不受lncRNA長度限制,同樣適用于circRNA的互作研究。產品特點包括體內互作研究、結果可靠、優化的緩沖液和方案、短反應時間、多功能性及產物適合多種下游實驗。請在收到試劑盒后,按標簽上的溫度儲存部件,組件在裝運之日起6個月內保持穩定。廣州如期生物技術有限公司專注于生命科學、轉化醫學,提供實驗試劑耗材、技術服務、實驗數據處理及figure制作服務。
EMSA實驗用于檢測蛋白質與DNA或RNA的結合情況,揭示它們在細胞內外的相互作用機制。隨著技術發展,EMSA實驗的應用范圍擴大,不僅限于蛋白質與DNA結合的分析,還擴展到了蛋白質與RNA結合的研究,如碧云天推出的化學發光法RNA EMSA試劑盒。實驗原理基于DNA或RNA與蛋白質復合物在聚丙烯酰胺凝膠電泳中遷移率不同,通過標記核酸探針,觀察蛋白質是否與其結合產生“滯后”條帶,進而推斷細胞內是否發生相似的結合反應。實驗通常設置包括陰性對照、常規反應、探針冷競爭反應、突變探針的冷競爭反應及super-shift反應等分組,以驗證探針的特異性及探知結合蛋白的身份。
EMSA實驗在科學研究中扮演重要角色,案例一中,中國科學院青島生物能源與過程研究所的呂雪峰、朱濤等人與德國佛萊堡大學合作,通過碧云天化學發光法EMSA試劑盒(GS009)及BeyoECL Plus (超敏ECL化學發光試劑盒)(P0018)對cyanobacterium Anabaena sp基因組中的MerR型轉錄調節因子Alr3614及其同源物進行研究,為CAST系統工作模式的認知及基因編輯工具的開發提供了新思路。案例二中,中國農業大學劉金華及寧夏大學魏凡華共同通訊在Nature Microbiology雜志上發表的研究成果,通過碧云天EMSA探針生物素標記試劑盒(GS008)成功對目標DNA進行了標記,研究證明了DNA感應器IFI16對IFN-I的增強產生以抑制甲型流感病毒復制。
產品介紹:超級生物素快速標記試劑盒為用戶提供全面的生物素標記解決方案,適用于蛋白、抗體、多肽等大分子的伯氨基(NH2-)標記。
產品特點:
1. 優化的生物素連接臂設計,減少空間位阻,適用于細胞表面標記。
2. 簡單的操作流程,無需額外試劑準備。
3. 短時間完成標記過程,僅需90分鐘。
4. 離心脫鹽去除游離生物素,無需透析或凝膠過濾。
標記計算:標記量取決于待標記物的濃度和分子量。例如,針對2mg/ml的IgG(150KD),使用生物素和抗體的分子比為20:1,可實現最佳效果。其他蛋白根據實際情況參照此比例進行。
計算公式:V(μL) = (V1(mL) * C1(mg/mL) * R) / M / C(mM)
實驗前準備:
1. 閱讀使用說明書。
2. 計算所需生物素量,參照計算公式。
3. 將試劑盒置于室溫20分鐘。
4. 將生物素配制為10mM濃度。
操作步驟(標記1mg抗體為例):
1. 在超濾管中加入待標記抗體,使用標記緩沖液稀釋至2mg/mL,12,000g離心10分鐘,重復直至濃度穩定。
2. 加入活性超級生物素,混勻后37℃避光溫育30分鐘。
3. 12,000g離心10分鐘。
4. 使用標記緩沖液調整濃度,重復離心。
答案
普通DNA Marker可以被生物素或DIG標記,但需要使用相應的化學試劑盒進行標記。其中,生物素和DIG均是常用于核酸檢測的標記物質。
解釋
例如,對于生物素標記,可使用生物素-蛋白A(Biotin-Protein A)復合物或生物素-11-UTP等試劑盒進行DNA標記;對于DIG標記,則可使用DIG-11-dUTP或DIG-11-dUTP+DNA Pol I等試劑盒進行標記。標記完成后,將DNA Marker與探針(如熒光素探針或辣根過氧化物酶亞硫酸酯探針)結合,即可進行核酸檢測。需要注意的是,在進行DNA標記時,應根據實驗設計和需求選擇合適的標記物質及試劑盒,并嚴格按照說明書操作。
抗生物素蛋白鏈菌素 為什么用這個標記
該試劑盒是一種時間分辨的熒光共振能量轉移免疫分析,該反應是一個競爭免疫反應,即銪標的cAMP示蹤復合物與體系中的cAMP競爭結合標有Alexa Fluor 647染料的cAMP抗體。銪標cAMP示蹤復合物是通過Biotin標記的cAMP與銪標的抗生物素蛋白鏈菌素(streptavidin)與抗體的復合物緊密結合產生的。
當抗體結合到示蹤劑上時,340nm的激發光激發銪標分子,導致能量轉移到Alexa Fluor 647染料上,結果產生665nm的發射光。熒光的強度與樣品中的cAMP含量成反比。
本試劑盒用于檢測在GPCR激動劑刺激下活細胞或者細胞膜制備品產生的cAMP。對于偶聯Gαs的受體,激動劑刺激導致665nm的熒光強度降低,而拮抗劑則可以逆轉這一效應;對于偶聯Gαi的受體,在激動劑刺激的同時用forskolin刺激cAMP產生,那么激動劑則抑制forskolin誘導的cAMP的生成,因此對照只給forskolin的細胞組可以通過665nm熒光強度的增加反應激動劑的效應。
該試劑盒的靈敏度很高,室溫下反應在20h內是穩定的。本試劑盒適用于在384孔板中進行24μl的微量分析。
以上就是生物素標記試劑盒的全部內容,答案普通DNA Marker可以被生物素或DIG標記,但需要使用相應的化學試劑盒進行標記。其中,生物素和DIG均是常用于核酸檢測的標記物質。解釋例如,對于生物素標記,可使用生物素-蛋白A(Biotin-Protein A)復合物或生物素-11-UTP等試劑盒進行DNA標記;對于DIG標記。