生物質譜?【答案】:是通過測定生物樣品離子的質荷比(m/z)來進行成分和結構分析的分析方法。生物質譜技術可以使核酸或蛋白質、多肽等生物大分子產生帶單電荷或多電荷的分子、離子,從而能夠測定其分子量。那么,生物質譜?一起來了解一下吧。
這個難度有點大啊,質譜的書籍有N多,簡單的說兩句
質譜是帶電粒子按質荷比大小順序排列的圖譜.最初主要用來測定元素或同位素的原子量.隨著科學的發展及高性能質譜儀器的出現,質譜被越來越多地應用于生命科學研究的許多領域,以基質輔助激光信答解吸附飛行時間質譜(MALDITOF)和電噴霧質譜(ESI)為代表的現代生物質譜技術,為蛋白質等生物大埋坦告分子的研究提供了必要的彎明技術手段.
現在質譜的發展非常的快,你這個問題主要是要解決什么?
【答案】:是通過測定生物樣品離子的質荷比(m/z)來進行成分和結構分析的分析瞎檔衡方法。生物質譜技術可以使核酸或蛋白質、多肽等生物磨做大分子產生帶單電荷或多電荷的分子蠢叢、離子,從而能夠測定其分子量。
hait等發展一種稱為宏旦寬“protein ladder sequencing”的方法,通過對Edman降解法的修改,產生一系列截去N端殘基的肽段,用MALDI-MS測得這些肽段的質量,從而推測N端序列。Patterson等利用羧肽酶Y酶解法并結合MALDI-TOF MS質量分析法遲迅同樣測得了C端得肽序列。Mann等用串聯質譜技術分析肽段可得到這樣的信息:N端段質量、C端段質量和中蔽亮間少數幾個殘基的序列,稱為“肽序列標記”(peptide sequence tag,PST),并認為這樣的標記比部分肽序列信息在查庫時更具限制性。
質譜技術的基本原理是樣品分子離子化后,根據不同離子間的荷質比(蘆游燃m/e)的差異來分離并確定分子量。其原理并不新鮮,但是在80年代早期出現的兩種新的離子化技術,使質譜從僅能分析小分子揮發物質到可以研究生武打分子,80年代末又發明了兩種更新的離子化技術,一種是介質輔助的激光解吸/離子化(matrix-assisted laser desorption/ionization,MALDI),另一種是電噴霧離子化(electrospray ionization,ESI)。這些技術能快速而極為準確地測定生物大分子的分子量;在結合各種新的質譜分析技術,便可以在各種水平上研究蛋白質,為蛋白質研究開辟了新的道路,是蛋白質組研究從蛋白質深入到高級結構研究,以及各種蛋白質之間的相互作用研究。
另外,對于蛋白質和多肽,質譜的發展還有一個重要的用途是肽的測序。這是采用串聯質譜(Tandem-MS),即在第一級質譜得到肽的分子離子,選取目標肽的離子作為母離子,與惰性氣體碰撞,使肽鏈中的肽鍵斷裂,形成一系列離子,即N端碎片離子系列(B系列)和C端碎片離子系列(陪虛Y系磨答列),將這些碎片離子系列綜合分析,可得出肽段的氨基酸序列。
目前商業化的生物質譜儀,其離子化方式主要是電噴霧電離與基質輔助激光解吸電離,前者常采用四極桿質量分析器,所構成的儀器稱為電噴霧(四極桿)質譜儀(ESI-MS),后者常用飛行時間作為質量分析器,所構成的儀器稱為基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜儀(MALDI-TOF-MS)。ESI-MS的特點之一是可以和液相色譜、毛細管電泳等現代化的分離手段聯用,從而大大擴展了其在生命科學領域的應用范圍,包括藥物代謝、臨床和法醫學的應用等;MALDI-TOF-MS的特點是對鹽和添加物的耐受能力高,且測樣速度快,操作簡單。此外,可用于生物大分子測定的質陵舉凱譜儀還有離子阱(ion trap,IT)質譜和傅里葉變換離子回旋共振(Fourier transform ion cyclotron resonance,FTICR)質譜等尺喚。而最近面市的答帶最新型的生物質譜儀是液相色譜-電噴霧-四極桿飛行時間串聯質譜儀(LC-ESI-MS-MS)與帶有串聯質譜功能的MALDI-TOF質譜儀,前者是在傳統的電噴霧質譜儀的基礎上采用飛行時間質量分析器代替四極桿質量分析器,大大提高了儀器的分辨率、靈敏度和質量范圍,其商品名有Q-TOF和Q-STAR等;后者是在質譜中加入了源后降解(post-source decay,PSD)模式或碰撞誘導解離(collisionally induced dissociation,CID)模式,從而使生物大分子的測序成為可能。
以上就是生物質譜的全部內容,對分離的蛋白質 進行鑒定是蛋白質組研究的重要內容,蛋白質微量測序、氨基酸組成分析等傳統的蛋白質鑒定技術不能滿足高通量和高效率的要求,生物質譜技術是蛋白質組學(Proteomics)的另一支撐技術。