微生物檢測方法?1.1體積測量法:通過測定一定體積培養(yǎng)液中所含菌絲的量來反映微生物的生長狀況。此方法簡便,快速,但需要設定一致的處理條件,否則偏差很大。由于離心沉淀物中夾雜有一些固體營養(yǎng)物,結(jié)果會有一定偏差。1.2稱干重法:可用離心或過濾法測定。一般干重為濕重的10-20%。在離心法中,那么,微生物檢測方法?一起來了解一下吧。
微生物檢測或鑒定技術(shù)主要包括顯微鏡直接觀察、選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基等方法。通過顯微鏡直接觀察,可以在特定的培養(yǎng)條件下觀察到微生物的菌落特征,包括形狀、大小、隆起程度和顏色等,以此來判斷微生物的種類。
選擇培養(yǎng)基是另一種常用的檢測方法,其作用在于允許特定種類的微生物生長,同時抑制或阻止其他微生物生長。例如,使用尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基能夠培養(yǎng)出可合成脲酶的微生物;而在酸性培養(yǎng)基中,霉菌的生長繁殖會受到抑制,細菌的生命活動則會受到抑制。選擇培養(yǎng)一般通過觀察微生物的同化作用類型或某一特征進行間接判斷,得到的微生物往往并不只有一種,但能夠大致確定這些微生物存在的共有特征,從而對其分類。
鑒別培養(yǎng)基則是根據(jù)微生物的代謝特點,在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學藥品。例如,在水質(zhì)檢驗中,大腸桿菌的檢驗就是使用伊紅—美藍試劑,該試劑與水或乳制品中的大腸桿菌反應會出現(xiàn)深紫色且?guī)в薪饘俟鉂?,這是大腸桿菌的特征反應。與選擇培養(yǎng)相比,鑒別培養(yǎng)基的鑒別所得結(jié)果的范圍比較小,一般可以直接測定某微生物的種類。
一、生長量測定法
1.1體積測量法:通過測定一定體積培養(yǎng)液中所含菌絲的量來反映微生物的生長狀況。此方法簡便,快速,但需要設定一致的處理條件,否則偏差很大。由于離心沉淀物中夾雜有一些固體營養(yǎng)物,結(jié)果會有一定偏差。
1.2稱干重法:可用離心或過濾法測定。一般干重為濕重的10-20%。在離心法中,將一定體積待測培養(yǎng)液倒入離心管中,設定一定的離心時間和轉(zhuǎn)速,進行離心,并用清水離心洗滌1-5次,進行干燥。干燥可用烘箱在105℃或100℃下烘干,或采用紅外線烘干,也可在80℃或40℃下真空干燥,干燥后稱重。如用過濾法,絲狀真菌可用濾紙過濾,細菌可用醋酸纖維膜等濾膜過濾,過濾后用少量水洗滌,在40℃下進行真空干燥。稱干重發(fā)法較為煩瑣,通常獲取的微生物產(chǎn)品為菌體時,常采用這種方法,如活性干酵母(activity dry yeast, ADY),一些以微生物菌體為活性物質(zhì)的飼料和肥料。
1.3比濁法:通過紫外分光光度計測定一定波長下的吸光值,判斷微生物的生長狀況。對某一培養(yǎng)物內(nèi)的菌體生長作定時跟蹤時,可采用一種特制的有側(cè)臂的三角燒瓶。將側(cè)臂插入光電比色計的比色座孔中,即可隨時測定其生長情況,而不必取菌液。該法主要用于發(fā)酵工業(yè)菌體生長監(jiān)測。
以下是微生物限度的檢測步驟:
1、 裝待檢品水樣的容器、取樣的吸管、鑷子等用品均要滅好菌,取水點打開讓水流動一段時間。后快速取水樣到容器中。
2、 把東西帶入微生物限度實驗室,以下步驟盡量在無菌條件下操作。
3、 先用緩沖液(PH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液)對待檢水樣進行1:
1、0 的稀釋(10ml純化水加90ml的緩沖液),后取10ml進行過濾,沖洗(用緩沖液50ml),沖洗量可按照驗證方法的量,但不宜太多,主要是考慮避免濾膜上的微生物受損傷。
4、 視情況可做2~3個梯度的稀釋濃度進行過濾,并每種培養(yǎng)基做雙份測試,當時在深圳藥檢所學習時,做了三個梯度,每個梯度每種培養(yǎng)基做了兩份,一個試樣水就用掉了12張膜。
5、 純化水微生物限度(微限)實驗做三個梯度的理由,曾經(jīng)有一個例子(藥品):曾經(jīng)遇到過的一種情況,用1:
1、0供試液倒平皿,可能會一個菌都不長,而1:
1、00及1:
1、000卻長很多,這主要是因為樣品藥物有抑菌的作用,在1:
1、0的條件下抑菌性還很高而是細菌被抑制生長,而1:
1、00、1:
1、000時被稀釋,抑菌性減小,有利于細菌的生長,這也是實驗要首先做驗證的原因,雖然純化水出現(xiàn)這種可能性是微乎其微,這么做應該算是一種嚴謹?shù)膽B(tài)度吧。
傳統(tǒng)檢測有三種方法
1、直接顯微鏡觀察,正常情況,在一定的培養(yǎng)條件下(相同的培養(yǎng)基、溫度以及培養(yǎng)時間),同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。可以通過顯微鏡觀察菌落特征對微生物種類進行判斷。
2、選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物或人為提供有利于目的菌株生長的條件,選擇培養(yǎng)基,其作用是允許特定種類的微生物生長,同時抑制或阻止其他微生物生長。選擇培養(yǎng)一般是通過觀察微生物的同化作用類型或某一特征進行間接判斷,得到的微生物往往并不只有一種,但是能夠大致確定這些微生物存在的共有特征從而對其分類。
3、鑒別培養(yǎng)基,根據(jù)微生物的代謝特點,在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學藥品。與選擇培養(yǎng)相比,鑒別培養(yǎng)基的鑒別所得結(jié)果的范圍比較小,一般可直接測定某微生物的種類。
現(xiàn)代定義
微生物:個體難以用肉眼觀察的一切微小生物之統(tǒng)稱。
微生物包括細菌、病毒、真菌、和少數(shù)藻類等。(但有些微生物是肉眼可以看見的,像屬于真菌的蘑菇、靈芝等。)病毒是一類由核酸和蛋白質(zhì)等少數(shù)幾種成分組成的“非細胞生物”,但是它的生存必須依賴于活細胞。
根據(jù)存在的不同環(huán)境分為空間微生物、海洋微生物等,按照細胞機構(gòu)分類分為原核微生物和真核微生物。
主要特征
1、體小面大
2、吸多轉(zhuǎn)快
3、生長繁殖快
微生物的這一特性使其在工業(yè)上有廣泛的應用,如發(fā)酵、單細胞蛋白等。
1. 直接顯微鏡觀察:在適宜的培養(yǎng)條件下,不同種類的微生物展現(xiàn)出獨特的菌落特征,這使得通過顯微鏡觀察菌落特征來判斷微生物種類成為可能。
2. 選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng):通過使用選擇性培養(yǎng)基,可以促進特定微生物的生長,同時抑制其他微生物。這種方法通?;谖⑸锏耐饔妙愋突蛱囟ㄌ卣鬟M行分類,雖然可能得到多種微生物,但能揭示它們的一些共有特征。
3. 鑒別性培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入指示劑或化學藥品,根據(jù)微生物的代謝特性進行分類。與選擇性培養(yǎng)基相比,鑒別性培養(yǎng)基的結(jié)果范圍更小,通??梢灾苯哟_定微生物的種類。
微生物是肉眼難以觀察的一切微小生物的總稱,包括細菌、病毒、真菌和某些藻類。雖然有些微生物如蘑菇和靈芝等可見于肉眼,但它們?nèi)詫儆谖⑸锏姆懂?。病毒是一種由核酸和蛋白質(zhì)組成的非細胞生物,必須依賴活細胞才能生存。根據(jù)生活環(huán)境,微生物可分為空間微生物、海洋微生物等;根據(jù)細胞結(jié)構(gòu),可分為原核微生物和真核微生物。
微生物的主要特征包括體積小而表面積大、新陳代謝快,以及生長繁殖速度快。這些特性使微生物在工業(yè)領域有著廣泛的應用,如發(fā)酵和單細胞蛋白的生產(chǎn)。微生物是人類生活中不可或缺的伙伴。
以上就是微生物檢測方法的全部內(nèi)容,1. 直接顯微鏡觀察:在適宜的培養(yǎng)條件下,不同種類的微生物展現(xiàn)出獨特的菌落特征,這使得通過顯微鏡觀察菌落特征來判斷微生物種類成為可能。2. 選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng):通過使用選擇性培養(yǎng)基,可以促進特定微生物的生長,同時抑制其他微生物。這種方法通常基于微生物的同化作用類型或特定特征進行分類。