目錄生物素修飾抗體 biotin生物素標記抗體原理 生物素化檢測抗體 biotin生物素標記抗體 生物素抗體標記
如果是同公司同貨號的抗體,差異就是在生物素上,生物素化的抗體是在一扮鄭抗嘩缺薯上偶聯了生物素,這樣可以亂者在下游檢測時通過親和素放大一抗的信號強度,而未生物素化的抗體,需要二抗用anti特異種屬的來進行信號放大。
商品化抗體一般都是生物素標輪橘記的
在做western blot或免疫組化時我們常使用一抗二抗來放大、顯示抗原,用酶或熒光標記二抗.生物素化的抗體,是在抗體上連接生物素(biotin),生物素能和親和素(avitin)特異性高親和性結陵空合,親和力是抗原抗體結合的一萬倍,而且一個avitin可以結合四個biotin,這樣又起到級聯放大的作用.所以能更加靈臘汪團敏的顯示微量抗原.這種方法也叫親和免疫組化.
主要表現在以下幾個方唯知面。
1放射免疫測定中的應用
BAS主要與免疫放射分析(IRMA)檢測體系偶聯,用于對終反應的放大(BA法):先將針對不同抗原決定簇的固相抗體和生物素化抗體與抗原(標準抗原和待測抗體)同時反應,在固相載體表面形成雙抗體夾心免疫復合物;再租州加入125I標記的親和素(或鏈霉親和素)與復合物中的生物素結合,最終使反應信號放大,進一步提高IRMA的靈敏度。如該用于測定促甲狀腺激素(TSH)時,由于方法的高靈敏性,即可將甲亢患者降低的TSH水平與正常值低限有效地予以區別。此外,BAS也可用于IRMA反應后B、F成分的分離:先將生物素化的McAb和放射性核素標記的McAb與抗原的不同抗原決定簇結合,反應平衡后,加入表面偶聯有親和素的聚苯乙烯珠與免疫復合物中的生物素連接成固相終產物。該法的優點是克服了其他指型消IRMA法需多次離心的麻煩.待測復合物與固相結合更牢固,操作更簡便。
2在分子生物學中的應用
BAS在分子生物學領域中的應用日漸增多,目前主要集中在以生物素標記核酸探針進行的定位檢測,用BAS制備的親和吸附劑進行基因的分離純化以及將免疫測定技術與PCR結合建立免疫—PCR(immuno-PCR)用于抗原的檢測等三方面。
【鉛嫌差答案】:D
ABC為親和素-生物素化酶復合物技術;LAB為者信標記親和素-生物素槐皮的方法;直接法為生物素化第一抗體;間接法BAS為生物素化第二抗體。
可以。和其他抗體的保存方法一樣。生物素非常穩定,而且大納一旦標記到抗體上后就不會脫落。所桐冊以只要按照普通抗體的保存方法保存就可以了。
生物素只有在長時間暴露局仿宏在紫外下才會分解,其他時候都非常穩定的。