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質粒DNA提取實驗是一種在分子生物學領域中常用的實驗技術,主要應用于遺傳工程改良物種、基因研究等。提取質粒DNA的步驟包括搖菌培養、收獲細菌并裂解、質粒的純化等幾個關鍵步驟。
首先,進行搖菌培養。將鑒定測序正確的克隆菌液涂在LB固體平板上,置于37℃恒溫培養箱中培養12-17小時,待菌落長出。隨后,滅菌15ml離心管,并加入含抗生素的LB液體培養基,編號標記。挑取單克隆菌團放入液體培養基中,每個培養基放置一個菌落。最后,在37℃條件下,以180rpm的速度振蕩培養過夜。
接下來,收獲細菌并裂解。將擴增好的菌液離心,根據說明書將菌液重懸并轉入1.5ml離心管中。使用質粒小量抽提試劑盒,按照說明書步驟提取質粒。接著,進行高速離心,去除上清,加入RB溶液充分懸浮細菌。然后,加入LB溶液,進行細菌裂解,室溫下放置2分鐘。裂解后,加入NB溶液,室溫下放置2分鐘,以充分中和。最后,進行高速離心,得到純凈的質粒DNA。
質粒DNA提取完成后,進行電泳檢測,通過1%瓊脂糖凝膠電泳,上樣量為2ul,紫外燈下觀察,最明亮的帶為超螺旋形式,表明提取質粒的純度較高。
在提取的質粒DNA純化過程中,首先將提取好的質粒放入1.5ml離心管中,加入1/10體積的3mol/L無菌乙酸鈉溶液,然后加入2倍體積的無水乙醇,放置于-20℃沉淀4-6小時或過夜。
微生物菌體濃度的測定方法:
活菌計數法
此法能準確地判斷菌液濃度,但有明顯的滯后性,無法在第一時間內2確定其實際濃度,待結果出來后,再開始檢測,菌的活性將有所下降,給實驗室操作帶來諸多不便;
比濁法
此法能快速地判斷菌液濃度,但為粗略的估計值,受限于各人肉眼的觀察,誤差較大,準確性不高。
微生物菌體濃度的測定(纖維制品的抗菌性試驗方法為例)
一、菌種:
大腸桿菌(EscherichiacoliATCC8099)
二、試劑與儀器
蛋白胨
牛肉膏
氯化鈉
Cary100紫外——可見光分光光度計
三、培養基
營養細菌培養基NB。
蛋白胨5g,牛肉膏粉3g,蒸餾水1000mL,pH6.8±0.2。
營養瓊脂培養基NA。
蛋白胨5g,牛肉膏粉3g,瓊脂粉15g,蒸餾水1000mL,pH6.8±0.2。
1、對數生長期菌液的制備
取在規定保存代數之內的供試菌種,在火焰旁,挑取一鉑金環,在營養瓊脂培養基上劃線,于37℃±1℃培養24h后,在平板上挑取飽滿的單菌落,置于20mL營養細菌培養基中,振蕩(110r/min,振幅3cm)培養24h。
2、穩定期菌液的制備
取培養好的對數生長期菌液0.4mL,于20mL營養細菌培養基中,再振蕩培養4h,即為穩定期菌液。
關于nb試驗室是什么如下:
NB實驗室是一款專門為初中生高中生打造的實驗軟件,為學生提供實驗裝備的自由搭配和實驗步驟的自定義設置,提高人們的科學研究能力和創作能力,用戶可以針對自己所學科目定制專屬的學習計劃,可以幫助初高中學生更好地學習和掌握實驗知識,根據所設定的時間表進行學習,包括虛擬實驗、視頻實驗、真實實驗等。
試驗室是進行各類試驗地點的統稱,可以是各種化學試驗、物理試驗、生物等自然科技也可以是人文科學。試驗室是一個系統,包含進行相應試驗相關的一系列儀器、物類、人員,是一個系統集成。
相關設備
試驗室用儀器統稱為試驗機,主要有拉力試驗機。
試驗機用途廣泛,更換不同夾具可測試各種材料及鞋底、輪胎、橡膠管、三角膠帶、塑料布、塑料板、包裝用薄膜、壓克.力、FRP、ABS、EVA、PV等成品、半成品或啞鈴狀試片之抗拉強度、伸長、撕裂、膠著力、抗拉應力、剝離、剪力、橡膠與金屬之黏接力。
實驗室與試驗室區別:
實驗室以實驗為主、已出報告驗證為主、化驗產品是否合格、出具檢驗報告,試驗室以試驗為主、驗證新的反應、以合成新物質、做試驗。
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NoBook。
生物實驗初中版多終端跨平臺。
NB生物實驗多終端跨平臺:基于“HTML5”技術,兼容PC端與移動端,windows、linux、android和iOS。實驗可輕松移植到各種不同的開放平臺以及應用平臺上,擺脫硬件的限制隨時隨地在各種不同。
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